摘要:问：前两天测序，送的菌液，800的反应，公司说测序不好，我看了一下测序峰图，信号衰减，信号越来越弱，到500BP以后就基本没有什么信号了，以前没有遇见这种情况，现在急着继续做实验，也没办法进行，希望大家帮忙，有什么解决的[阅读全文:]
摘要:问：PCR产物为什么要克隆测序？答：应该是确认一下，你所扩的条带是不是你想要的序列！答：因为PCR扩增中可能会有错配。 答：测序反应开始和结束的一些序列不够准确，所以最好将待测序克隆到载体上测序。另外用载体测效率较高，[阅读全文:]
摘要:问：本人拿菌液让生工测序，结果是双峰，是什么意思？怎么回事？重组的质粒用酶切鉴定没有问题。答：1、有可能是基因重复，重复的两个拷贝之间有一个硷基的差异。样品本身被污染，这常常发生在样品为质粒和菌液的情况中。当使用[阅读全文:]
摘要:问：本人现在的课题为扩增一段基因组DNA，产物直接测序。反向测序第100个碱基处为杂合子T/G，正向测序对应位置为A。重新扩增送样后测序结果相同。请问这种情况下可否判断第100个碱基处存在突变？如存在突变，为何两次正向测[阅读全文:]
摘要:问：我将PCR未纯化送测序公司测序，片段大小是344BP 。双向测序。正向结果正常，反向为何是双峰呢？测序引物PAGE回收的。结果附上：B01_S70509006_70509185_698_mtectF.rarB02_S70509006_70509186_698_mtectR.rar 答：通过比[阅读全文:]
摘要:Tyagi和Krammer于1996年设计了一种可以特异性识别核酸序列的新型荧光探针,这种荧光探针通过与核酸靶分子进行杂交后发生构象的变化而发出荧光,他们将其命名为分子信标(Molecular Beacon)。分子信标具有背景信号低,灵敏[阅读全文:]
摘要:问：刚做克隆，遇见测序过程中 有3'端测序，5'端测序，到底是怎么回事？为什么有两个测序结果？我应该按那一个来看测序正确还是不正确？答：测序都是从5'端进行的，正向和反向测序是指对DNA的两条互补链分别测序，通常两个方向[阅读全文:]
摘要:问：我用DNA扩增基因的外显子，连接PMD载体后转化大肠杆菌感受态，菌液PCR鉴定出现目的片段。送测序。测不出来。是我的PCR假阳性？还是我的送测样品有问题？答：菌液PCR假阳性高，我每次都提质粒后做酶切鉴定，这样准！也不排除[阅读全文:]