摘要:一、原理 可溶性抗原(或抗体)吸附于免疫学反应无关的颗粒(称为载体)表面上,当这些致敏的颗粒与相应的抗体(或抗原)相遇时,就会产生特异性的结合,在电解质参与下,这些颗粒就会发生凝集现象。这种借助于载体的抗原抗体凝[阅读全文:]
摘要:第一天:ELISPOT包被程序,提供两种方案供选择(严格注意无菌操作)一、传统酒精预湿包被程序该方案中,需经过:70%乙醇预湿PVDF膜、无菌去离子水洗涤去除乙醇、拍干,最后,加入已稀释好的包被抗体到各实验孔完成包被操作。具体[阅读全文:]
摘要:图注:ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。将指定数目的能产生IFN- 的T细胞与一百万个抗原呈现细胞(Antigen Presenting Cells,APC)混合后,使用ELISPOT 法(上图)、胞质内染法(中图)和ELIS[阅读全文:]
摘要:一、关于ELISPOT 1、什么是ELISPOT检测? 酶联免疫斑点( enzyme-linked immunosorbent spot, ELISPOT) 检测技术是通过两种高亲和力的特异性抗细胞因子抗体来检测淋巴细胞分泌细胞因子情况的一种方法。 淋巴细胞在体内被[阅读全文:]
摘要:为了实现ELISPOT的标准化,显色最好在恒温箱内进行,温度控制在25°C±5°C,显色25分钟为宜。另外,在37°C显色也是不错的一个方法,但要注意相应的缩短显色时间到12-18分钟,并且显色中勤检查。为了提高ELI[阅读全文:]
摘要:1、ELISPOT 分析中应该使用什么样子的吸头?吸取细胞中,推荐使用开口较大的管尖,以减少剪切力,防止T细胞的凋亡。请尽量不要将管尖碰到膜。2、有时候在培养皿底部有条纹和不规则的斑点出现。这是什么原因导致的?在分析过程[阅读全文:]
摘要:酶联免疫斑点(ELISPOT)技术是当今世界上检测生物体细胞免疫水平的最佳技术。它集高灵敏度、高可信度、高通量、单细胞水平、功能性检测与低成本等诸多优点于一身,在国内外免疫学界获得了广泛的应用,成为主流免疫学检测技术[阅读全文:]
摘要:透明板在操作的时候比PVDF板稍微容易点,PVDF板在使用时要进行预处理板,操作时还要小心不要把那层膜捅破了。透明板就是显示的斑点都是黑色的,不能进行几种因子的同时测定,而PVDF板就可以用斑点颜色的变化一次来测定几[阅读全文:]