摘要:免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠，葡萄球菌A蛋白（SPA）金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性，且它们之间的连接不会干扰抗原——抗体的结合。[阅读全文:]
摘要:彩色免疫金银染色方法（coloured IGSS,CIGSS）是由Frite和Hoenes等（1986）建立的一种新方法，刘彦仿等（1988）在《中华病理学杂志》上也报道了改进后的CIGSS方法。其基本原理是在IGSS法的基础上，根据洗彩色照片的显影原理而发[阅读全文:]
摘要:（一）石蜡切片IGSS（1）切片脱蜡至水。（2）0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min（98℃），自然冷却至室温。（3）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗3×3min.（4）l%EA（卵蛋白）15min,不洗。（5）适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或3[阅读全文:]
摘要:一、原理本法是由Geoghegan等（1978）首次应用金标探针检测B淋巴细胞表面抗原，将胶体金颗粒（大于20nm）标记在第二抗体或SPA分子上，制备成金标二抗。其原理是当特异性抗体与抗原结合后，用金标二抗或金标SPA与特异性抗体结[阅读全文:]
摘要:当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后，便可进行标记。具体步骤如下。（1）根据标记所用胶体金的总量计算出所需要待标记蛋白质的总量。（2）边搅拌边将蛋白质溶液加入胶体金溶液中，逐渐加入，lmg的蛋白质量大约需5[阅读全文:]
摘要:乙醇-超声波还原法（Baigent和Muller,1980）（1）取1%AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml双重蒸馏水。（2）用0.2mol/LK2CO3调pH至7.2，再加入lml无水乙醇。（3）用20KC、135W超声波探头浸入溶液内进行超声振荡，此法制备的颗粒为[阅读全文:]
摘要:标记好的免疫金探针必须经过纯化处理才能用于IHC染色，尤其是免疫电镜的染色。纯化的目的就是除去其中未标记的蛋白质，未充分标记的胶体金及在标记过程可能形成的各种聚合物。其纯化方法有超速离心法、色谱柱法以及以上二[阅读全文:]
摘要:滚动式循环放大（RCA）法是一种能够在恒温条件下，使标记有寡核苷酸探针（与组织细胞内的核苷酸无相关性）的抗体（特异性一抗或第二抗）与组织细胞内的抗原结合后，在DNA聚合酶的作用下，加入的寡核苷酸进行循环扩增，产生一条[阅读全文:]