摘要:问：想从酵母提取质粒，转化大肠杆菌，按分子克隆的方法，可能都线性化了，转化率为0，请问有什么好的办法？答：以下是我的方法，曾提过数百个，好像转化效率还可以,基本上都提出来了。个人体会是Lyticase的活性要好，而且涡流混[阅读全文:]
摘要:问：我要表达的多肽是4kd大小，该蛋白是一种抗菌肽.我用的载体是pPIC9，是分泌表达的。先简单说下我前期的工作：首先我用GS115就做了一次电转化后，MD板长了几个克隆，菌落PCR鉴定阳性率约为20%。然后进一步诱导，先挑单菌落[阅读全文:]
摘要:问：请问大家提取酵母的总RNA都用什么方法？有好用的试剂盒吗？酵母总RNA提取应该注意什么？答：使用热酚法抽提酵母RNA,很好用，至今没有失败过。(1)将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中，30℃过夜旋转培养。(2)稀释过夜培养的[阅读全文:]
摘要:Materials: Sterile LB medium (Luria-Bertani Medium) with or without antibiotic: water 500 ml bacto-tryptone 10 g bacto-yeast extracts 5 g sodium chloride 10 g stir to dissolve pH to 7.0 autoclave to s[阅读全文:]
摘要:问：我电转化的酵母抽基因组后做PCR鉴定，本就有颜色筛选的，应该成功率很大的啊，可是我鉴定了无数个克隆，就是拉不出PCR来。难道抽基因组的方法很关键吗？有的文献甚至用菌落做PCR，是不是骗人的啊？ 我是用蜗牛酶（鼎国）破[阅读全文:]
摘要:经过不断的努力，终于得到酵母表达阳性结果。特把表达的一些心得写下来，希望对正在努力中的XDJM有所帮助，也以此感谢生命经纬对我的帮助。分泌型载体：pPICZaC 宿主菌：X33 培养基：BMGY/BMMY 目的蛋白：20KD1、表达过程中防[阅读全文:]
摘要:生命经纬网友ljksbs：1、细菌保存于穿刺培养物中：一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下：用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落，针缓慢穿过琼脂到达瓶底，连续几次，盖上瓶盖拧紧，做好标记。室温下存放于暗处。（[阅读全文:]
摘要:目前常用的药敏试验方法如下：1、定性测定的纸片扩散法(disk diffusion test)，K-B法： WHO推荐的全球统一的标准方法。原理：含有定量抗菌货物的纸睡帖在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后[阅读全文:]