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"DNA技术" 分类下的词条该分类下有1132个词条创建该分类下的词条

BAC End-Sequencing
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
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摘要:For every 4 mls of culture, dissolve the BAC DNA pellet in 40 µl of water. for example: Usually each BAC is grown in 20 mls LB/CM total, then is dispensed into one Autogen tube (4 mls in each of[阅读全文:]

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Thermal?Inactivation
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
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摘要:A simple, reversible way to a stop restriction reaction is by adding EDTA, which chelates Mg2+ , thereby preventing catalysis. If further manipulations of the digested DNA are to be performed, the res[阅读全文:]

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Sequencing of BAC DNA--BAC DNA测序
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
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摘要:16 µl BigDye Terminator Ready Reaction Mix1 µg BAC DNA (determined from gel)10 pmol primerwater to 40 µlHeat tubes at 95℃ for 5 min., then perform 30 cycles of:95℃ x 30 sec55℃ x 10 s[阅读全文:]

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PREPARATION?OF?SEQUENCING?GELS
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
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摘要:MATERIALS:2-glass plates1 sharks -tooth comb and spacersWhatman 3 mm paper30 or 40% acrylamide-bis (19:1)10X TBEurea10% ammonium persulfateTEMED60 cc. syringeRain-exPreparation of glass plates:Wash an[阅读全文:]

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放射性同位素标记的DNA序列测定分析
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
标签: 放射性同位素 DNA序列

摘要:测定DNA 的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA 测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA 聚合[阅读全文:]

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克隆心得―帮助新手快速做出克隆
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
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摘要:本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创,我在其基础上进行了一些改动,主要是DNA回收上采取了更简单的方法。(本方法最适用于双酶切制作片断并进行克隆 的情况。对于分步酶切制作片断,也可以使用本[阅读全文:]

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Chemical Sequencing of DNA
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
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摘要:This is a rapid method for chemical DNA sequencing which is commonly used as ladder for footprinting reactions or for sequencing of short DNA oligonucleotides.Reference: Bencini et al. (1984) Biotechn[阅读全文:]

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Shotgun Library
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
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摘要:This protocol is intended to make shotgun libraries from BACS that are to be fully sequenced and assembled. To minimize chimeric clones, an adaptor method is used. There are simpler protocols if just [阅读全文:]

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PCR产物的克隆
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
标签: PCR 产物克隆

摘要:PCR产物克隆大致分为两类,即平头连接和粘头连接。平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR 产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头;PCR 产物纯化后,可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min(利用该酶所具有的[阅读全文:]

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PCR技术(十):PCR产物克隆方法
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:24
标签: PCR技术 产物克隆

摘要:平端连接通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为3'突出一个碱基的DNA分[阅读全文:]

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