摘要:Gregory Hannon, Cold spring harbor labOur overall approach is to use an RNA polymerase III promoter to driveexpression of encoded short hairpin RNA (shRNA). For this purpose we use the humanU6 snRNA p[阅读全文:]
摘要:第二节 动植物组织mRNA 提取 一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织。 二、设备 研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽。三、试剂 1、无RNA 酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸[阅读全文:]
摘要:RNA extraction buffer:0.1M NaCl2% SDS50mM Tris/HCl (pH9)10mM EDTA20mM ß-mercaptoethanol1. Grind leaf tissue on liquid N in mortar and pestle.2. Transfer the ground tissue to a 10ml conical botto[阅读全文:]
摘要:第三节 植物病毒RNA 提取 大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。一、材料提纯TMV病毒液(10mg/ml)。二、设备冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,[阅读全文:]
摘要:Short PAXgene Protocol:spin in step 6 increased to 20 min; no Dnase treatment; optional wash after step 12 REQUIRED1.Centrifuge the PAXgene Blood RNA Tube for 10 min at 3000?5000 x g using a swing-out[阅读全文:]
摘要:与rRNA 和tRNA 不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA 中分离mRNA dmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步[阅读全文:]
摘要:一、用异硫氰酸胍提取 提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管。2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀。3.13[阅读全文:]
摘要:Diethyl pyrocarbonate derivitizes histidine residues and is therefore an effective method to inactivate nucleases including RNAse. CAUTION: DEPC is irritating to the eyes, skin, and mucous membranes. [阅读全文:]