摘要:OverviewMost RNA extractions procedures yield RNA, with minimal or no contamination with DNA, that is suitable for applications such as northern blot, constructions of cDNA libraries or microarray hyb[阅读全文:]
摘要:Reagents1 U/ul DNase I from Epicentre Technologies10X DNase I buffer （200 mM Tris, pH 8.4, 20 mM MgCl2, 500 mM KCl）For 1ml:200 mM Tris, pH 8.4200 ul 1M Tris, pH 8.4500 ul 1M KCl20 ul 1 M MgCl2280 ul D[阅读全文:]
摘要:A protocol / method / schedule /procedure for extraction / isolation of both DNA and RNA from the same material typically plant leaf / leaves1） Take one medium sized leaf or half a large leaf （5 to 20[阅读全文:]
摘要:采用Promega公司的PolyATract® 26reg；mRNA Isolation System III。使用该试剂盒，mRNA产量极低，因此下述方法是以Promega公司试剂盒操作手册为基础，并采用储昭晖硕士（作物遗传改良国家重点实验室植物分子生物学水稻[阅读全文:]
摘要:为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法，最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时，避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下[阅读全文:]
摘要:mRNA的分离方法较多，其中以寡聚（dT）-纤维素柱层析法最为有效，已成为常规方法。此法利用mRNA 3‘末端含有Poly（A+）的特点，在RNA流经寡聚（dT）纤维素柱时，在高盐缓冲液的作用下，mRNA被特异地结合在柱上，当逐渐降低盐[阅读全文:]
摘要:由于mRNA末端含有多poly（A）+,当总RNA流径oligo（dT）纤维素时，在高盐缓冲液作用下，mRNA被特异的吸附在oligo（dT）纤维素柱上，在低盐浓度或蒸馏水中，mRNA可被洗下，经过两次oligo（dT） 纤维素柱，可得到较纯的mRNA。实验步骤：[阅读全文:]
摘要:一、材料水稻叶片或小鼠肝组织。二、设备研钵，冷冻台式高速离心机，低温冰箱，冷冻真空干燥器，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。三、试剂1、无RNA酶灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小时）装蒸馏水，然后加入0.01%的DEPC（体积/体[阅读全文:]
摘要:Preparation of CellsPrepare or collect between 2x107 cells for each mRNA prep （will yield about 10-20μg of mRNA）. If PBMCs from a whole blood sample are to be used, the sample should be prepared wi[阅读全文:]