摘要:siRNA Design RNAi target selection rules :Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG). Search for sequence motif AA(N19 )TT[阅读全文:]
摘要:Using siRNA for gene silencing is a rapidly evolving tool in molecular biology. There are several methods for preparing siRNA, such as chemical synthesis, in vitro transcription, siRNA expression vect[阅读全文:]
摘要: A．普通阴性对照1.siRNA实验应该有阴性对照；2.通用阴性对照为与目的基因的序列无同源性的普通阴性对照；3．Scrambled阴性对照和选中的siRNA序列有相同的组成，但是和mRNA没有明显的同源性；4．阴性对照需要确定和目的靶细[阅读全文:]
摘要:Supplementary information to miRNAs cloned from mouse and human An online clearinghouse for miRNA gene name assignments (http://www.sanger.ac.uk/Software/Rfam/mirna/) is provided by the Rfam database [阅读全文:]
摘要:将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞 中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀将氯化钙，RNA(或DNA )和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA 且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA 复合物粘附到细胞 膜[阅读全文:]
摘要:1．希望软件可以在 web 上使用。 即用户可以访问我们的网站， 输入基因代码， 即可自行在网上设计 siRNA Oligo 。2．可参照的软件形式： 见如下网站： www.dharmacon.comwww.ambion.comwww.qiagen.com3．希望能就每一个所指定[阅读全文:]
摘要:1）检测RNA 溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0时，我们认为RNA 中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容[阅读全文:]
摘要:第一节 概 述从真核生物的组织或细胞中提取mRNA，通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链，将双链cDNA和载体连接，然后转化扩增， 即可获得cDNA文库，构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较[阅读全文:]
摘要:TRIzol method for RNA isolation-To tissue or cells, add 200- 1 ml TRIzol (GIBCO BRL)1.homogenize for 60 sec (vortex or polytron)2.add 40ul-200 ml chloroform (1/5 volume of Trizol)3.mix by vortexing fo[阅读全文:]
摘要:Preparation of Cells1.Prepare or collect between 2x107 cells for each mRNA prep (will yield about 10-20µg of mRNA). If PBMCs from a whole blood sample are to be used, the sample should be prepar[阅读全文:]