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TaKaRa RNAiso Reagent
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:52
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摘要:本制品是一种快速方便的总RNA提取试剂,可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。样品在RNAiso Reagent中能够充分被裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层),RNA分布在上清层[阅读全文:]

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总RNA的提取
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:52
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摘要:完整RNA 的提取和纯化,是进行RNA 方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点,即1):样品细胞或组织的有效破碎;2),有效地使核蛋白复合体[阅读全文:]

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RNA purification --- hot phenol protocol
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:52
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摘要:Hot phenol may also be used to remove DNA.1. Add equal volume of TE-saturated phenol to RNA solution. Mix.2. Heat to 70 ℃ for 5 minutes.3. Centrifuge at top speed for 10 minutes at room temperature.4.[阅读全文:]

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CONCERT细胞质RNA纯化试剂
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:52
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摘要:CONCERT细胞质RNA 纯化试剂是一种新颖的单相酚溶液,是专门设计用来从新鲜或冷冻的培养的动物细胞 或组织中快速、简单地纯化高质量的细胞质RNA 。应用利用CONCERT™细胞 质RNA 试剂分离的总RNA 能够用于构建cDNA文[阅读全文:]

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RNA的定量和完整性分析
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:51
标签: RNA定量

摘要:RNA的完整性可以通过琼脂糖变性电泳分析检测,而含量则通过紫外分光光度计确定。常见的变性电泳有甲醛变性电泳,戊二醛变性电泳等。甲醛变性电泳检测RNA完整性一、材料、试剂和仪器1 材料: 植物总RNA 5-10μg2 试剂:1)加[阅读全文:]

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防止RNA酶污染的措施
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:51
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摘要:在所有RNA实验中,最 关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛 存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过[阅读全文:]

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Ribonuclease?Protection?Assay
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:51
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摘要:Ribonuclease Protection Assaycontributed by James McCaughern-Carucci, Yale UniversityMost RNase Protection protocols require an overnight hyb with numerous subsequent clean-up steps. This method requi[阅读全文:]

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Ribonuclease?Protection?Assay
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:51
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摘要:1. Add appropriate volumes of RNA (<12 ul) plus probe (< 3 ul). Try 5 and 10 ug RNA plus 600 or 800 pg dig labelled probe.2. Include 2-3 yeast RNA samples/probe used. 2ul of 5mg/ml stock.3. Add 20 ul [阅读全文:]

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体内表达shRNA的设计
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:51
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摘要:1.克隆到shRNA 表达载体中的shRNA 包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔的,组成发夹结构,由polⅢ启动子控制。随后在连上5-6个T作为RNA 聚合酶Ⅲ的转录终止子。2.两个互补的寡核苷酸两端须带有限制性酶切位[阅读全文:]

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siRNA用户指南
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:51
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摘要:Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequenceUsing Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et al. 1999), we have systematically analyzed the silencing efficiency of siRNA duplexes as a fun[阅读全文:]

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