摘要:固相pH梯度等电聚焦是80年代建立起来的一种等电聚焦技术，其所用的介质是一些具有弱酸或弱碱性质的丙稀酰胺衍生物，它们于丙稀酰胺和甲叉双丙稀酰胺有相似的聚合行为。固定化电解质一端的双键可以在聚合中共价结合到聚[阅读全文:]
摘要:一、目的要求1.学习电泳原理和技术2.学习和掌握SDS－聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术二、原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide，简称Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(N，N—methylene-bisacylamid[阅读全文:]
摘要:如果要进行天然等电聚焦电泳，要做一些修改：1.胶过程中配的凝胶中不需要加尿素；2.上样缓冲液（2×）5ml：其中1.8ml水，200μl载体两性电解质（同制胶成分），3ml甘油，上样时候于等体积样品混匀，10000×g离心5敏[阅读全文:]
摘要:主要仪器试剂仪器：微型电泳系统、电源、注射器、固定和染色用容器试剂：丙稀酰胺、双－丙稀酰胺、载体两性电解质、尿素、过硫酸胺、TEMED、TritonX－100、2－巯基乙醇、溴酚蓝、磷酸、氢氧化钠、氯化钾、三氯乙酸、考马斯亮蓝、甲醇、乙酸。[阅读全文:]
摘要:载体两性电解质必备的条件：1.可溶性要好，为了保证等电聚焦过程中PH梯度的形成和蛋白样品的迁移，载体两性电解质必须具有很好的溶解性能。2.紫外吸收低，不发荧光。由于制备分离时，检测蛋白质的方法通常是测量280cm的吸光[阅读全文:]
摘要:等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术，等电聚焦中，蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸，在电场中形成正极为酸性[阅读全文:]
摘要:J.Movius,K,Coachman,and S.Hahn (Hahn Lab)last modified 10/9/00Induction of BRF in bacteria and purification on Ni-NTA agaroseTransform BRF plasmid into strain BL21 DE3 (pLysS)or JM25 (DE3 containing t[阅读全文:]
摘要:Materials Expression plasmid (e.g.,pET/Ncd in BL21(DE3)pLysS host cells)ZB = 10 g NZ-Amine A5 g NaCl860 ml final volume10X M9 Salts = 1 g NH4Cl3 g KH2PO46 g Na2HPO4100 ml final volumeM9ZB = 860 ml ZB [阅读全文:]
摘要:This is a method for the separation and identification of proteins in a sample by displacement in 2 dimensions oriented at right angles to one another. This allows the sample to separate over a larger[阅读全文:]
摘要:Comments: pSV281 RPA70AB Constructed by L.Mizoue; May '02.This plasmid encodes RPA 70 subunit residues 181-422 as a fusion protein with an NT 6His tag.The tag can be cleaved off with TEV protease (rec[阅读全文:]