问:我想用该法测一种蛋白酶对混合蛋白底物(其实是昆虫体壁蛋白)的酶活。请问:像我这种情况,还有必要做酪氨酸标准曲线吗,用得找吗?结果的酶活力应该怎么表示?是相当于对照吸光值增加的百分比吗?对照的设计,除传统的先加TCA后加底物外,我是否可以先用沸水浴灭活处理酶,然后按正常的顺序做底物,再做TCA? 答:这个与Folin-酚有什么关系? 1、你的底物不是酪蛋白。 2、沸水浴灭活处理酶,这样的对照肯定是不严格得,还要用光是TCA和缓冲液的做参比测定吸光度,当然一个先加TCA后加底物。另一个先加底物后加TCA了。 3、应该测对照液的吸光度值,但是对照液用什么是个问题。 所以可以用相当于对照(先加TCA后加底物)吸光值增加的百分比来表示。
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