问:吾欲纯化一种丝氨酸蛋白酶,为了保持其活性和防止其他酶的降解,吾欲加PMSF,行乎? 答:你不能加PMSF,因为PMSF是一种不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制羧肽酶Y,糜蛋白酶,Factor Xa,木瓜蛋白酶,纤溶酶,蛋白酶K,枯草杆菌蛋白酶,凝血酶及胰蛋白酶。 不知道你的丝氨酸蛋白酶从哪里提取的,我们也在做丝氨酸蛋白酶的分离纯化,一般不加抑制剂,只是你操作的时候应该尽量保持低温,同时样品应该低温或者冷冻保存。 |
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