问：看了一些关于CSCL梯度离心的资料，但是感觉都不一样，而且过程不清楚。现在想请教一些问题：

1、CSCL的密度和转数问题。

2、关于CSCL的灭菌。

答：因为是要做体内实验，谢谢各位了这是我们实验室的操作步骤：

在每4 ml溶解质粒的TE溶液，加入4 g 的CsCl，手温加热使CsCl固体溶解，然后转入超速离心管中，向每管中加入0.2 ml的EB（10 mg/ml），再用TE调节平衡，使液面离管口距离约为1 mm。

25 ℃，62 500 rpm， 离心16 hrs。离心完毕后，将离心管轻轻取出，固定于铁架台上，在暗室下，用带18号针头的5 ml一次性注射器在离管底最近的一条红色的环带（超螺旋质粒带）下附近刺穿管壁，将目的带慢慢的吸出，超作时尽量不要将分层的液面扰动。

把含超螺旋质粒的液体转入新的超速离心管中，加入含有1 g/ml CsCl 的TE溶液，向其中加入0.05 ml的EB（10 mg/ml），25 ℃，625 000 rpm， 离心16 hrs。