问：有战友建议发起双荧光素酶实验的讨论，我深有同感，做实验一年，发现须解决的问题仍多多。我用过Roche的单荧光素酶，和promega 的双荧光素酶测定系统，试过不同的比率 （renilla and pGL3 promoter vector (or pGL3 control vector）， 但是我发现normalize 后，比率全都接近于1， 我不知道是不是存在quencing 的问题。请大家告诉我你们经常用的比率是多少？ 是否遇到过第一荧光猝灭不完全的现象？ 还是因为renilla 本身的荧光就很高。

答：大约是0.2-1之间。转染的时候pGL3 promoter vector /renilla的比例是20：1，测出的荧光相对比值是0.1-1之间，具体还要根据自己的细胞摸索条件。