问:我要在肿瘤细胞中提取一种酶.按药理实验技术操作:PBS洗涤后的细胞加入TMN buffer(10mM Tris.HclPH7.5 ,1.5mM MgCl2,10mM NaCl),冰浴10min,加入 3% sarcosyl 后冰浴15min,时常振摇.2500 g离心20min,沉淀为絮状,且溶液呈粘稠状。无法去上清取沉淀。重复了几次都是一样的结果,我不知道怎么回事,请大家帮我分析一下。 答:是转速太低,我从肝细胞中提取微粒体酶用了两次离心,先用12000g,取上清液再用100000g取沉淀。 |
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