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酯酶同工酶差异性分析实验的聚丙稀酰胺凝胶中需要加SDS吗?

标签: 酯酶同工酶 差异性 分析 聚丙稀酰胺 凝胶 SDS

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问:我要做不同辣椒品种酯酶同工酶差异性分析,电泳实验的聚丙稀酰胺凝胶中到底需要加SDS吗?我只知道加了是按分子量大小分离的,不加的话电荷也能影响酯酶在胶板中的迁移速度,我查的酯酶同工酶资料中有些加了SDS,有些没有加,到底加不加呀?望高手指教!

答:加与不加都有意义。加了SDS后蛋白就会变性,SDS能打断氢键和疏水键,上样Buffer中的还原剂巯基乙醇或DTT则能够破坏蛋白质二硫键,使蛋白的构象和形状发生改变,使蛋白电泳的迁移率仅与分子量有关。所以能反映分子量大小的差异。

而不加SDS,就是非变性电泳。这样就不会破坏蛋白本身的结构,也能反应蛋白多聚体的情况。一点拙见,希望对你有用。

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