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常用HE试剂配制

标签: 常用 HE试剂 配制

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一、苏木素

(1) Harris苏木素:

配方:
苏木素 1 g 无水乙醇 10 ml
蒸馏水 200 ml 钾明矾 20 g
HgO 0.5 g

先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把明矾放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木素,煮沸 2 分钟,先加入少量的氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定:以每天100张片的量,可使用半个月左右。 其实不及着用的话,不加氧化汞也行。待苏木素自然氧化。[室温不同,氧化的时间也不同,一般需要三个月左右,用前过滤加冰醋酸。这种方法用的时间比较长]

(2)Gill改良苏木素液
苏木精 2 g 无水酒精 250 ml
硫酸铝 17.6 g 蒸馏水 750 ml
碘酸钠 0.2 g 冰醋酸 20 ml

先将苏木精溶于无水酒精,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。此液为半氧化苏木素液,不会产生沉淀,氧化膜少。是进行性染色的配方,不用分化,染色时间在4-10分钟左右,效果很好。特别适用于染色机染色。

二、伊红

(1)伊红(水溶性)

配方:
伊红 (水溶性) 2.5-5 g
蒸馏水 500 ml

将水溶性伊红溶于蒸馏水中,然后加浓盐酸10毫升,充分搅拌,静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次,再过滤;将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥,加95%酒精1000毫升,配成饱和液。使用前再用95%的酒精 1:1~2倍稀释,加入1~2%冰醋酸。
此方法具有染色时间快,颜色鲜艳,不容易褪色,使用寿命长等特点。

(2)伊红(醇溶性)

配方:
伊红 (醇溶性) 2.5-5g
75%酒精 1000 ml
加几滴冰醋酸至半透明状。

三、 固定液

(1)12%中性福尔马林(pH7.0)
甲醛 120 ml
NaH2PO4•H2O 4 g
Na2HPO4 13 g
蒸馏水 880 ml

(2)12%酸性福尔马林(PH 4.5)
甲醛 120 ml
水 830 ml
冰醋酸 50 ml

(3)12%福尔马林
甲醛 120 ml
水 880 ml

(4) Bouin 固定液
饱和苦味酸 75 ml
甲醛 25 ml
冰醋酸 5 ml

四、盐酸酒精分化液
  浓盐酸        0.5~1 ml
  75%酒精         99 ml

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