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标签: 物理图谱

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物理图谱有许多结构和形式。一个极端是限制性图谱(restriction map),用于对小区域、如kb量级做精细结构制图,另一个极端是细胞遗传学图(cytogenetic map),用于对以104 kb为长度量级的区域制图。但是,最常用的两种类型还是STS含量图(STS content map)和放射性杂交图(radiation hybrid map),它们的分辨区域都大于1Mb,并且有能使用简易PCR中的定位标记物的优点。
在STS含量图中,STS标记物通过多聚酶链反应所监测,在反应中它与一个大的插入克隆基因库反应,如酵母人工染色体(TACs),细菌人工染色体(BACs)和粘粒等。如果两个或多个STS被发现是存在于同一个克隆之中,那么这些标记位点紧密相邻的机会就很高(不是100%,因为在制图过程中存在一些假象,如出现嵌合克隆体)。一段时期以来,根据STS含量图已经建立起一系列重叠群,如含有STS的重叠簇克隆。这样一张图的分辨率和覆盖度由一些因子决定,如STS的密度、克隆群体的大小、以及克隆文库的深度。通常STS含量图以长1Mb的插入YAC库为基础,分辨率为几百个bp。如果使用插入部分较小的克隆载体,图谱就会有一个更高的理论分辨率,但是覆盖基因组同样大小面积就需要更多的STS。虽然一般有可能从STS含量图上得到标记物的相对顺序,但是相邻标记物之间的距离还是无法精确测得。尽管如此,STS含量图还是有与克隆原相关的优点,并且可将其用于更进一步的研究,如次级克隆或DNA测序。到目前为止,STS含量图制图简单而使用最多的来源是巴黎的CEPH(centre d’Etudes du Polymorphisme Humain)中的YAC库。它是一个10×覆盖率的文库,平均插入长度为~1Mb。
放射性杂交图对片段DNA的断点作图。在此技术中,一个人体细胞系被致死性的gamma射线照射,染色体DNA分成片段。然后该细胞系与一个仓鼠细胞系融合而被救,并能繁殖几代。在这期间,人类细胞和仓鼠细胞的杂合体随机丢失其人类染色体片段。这样一百个或更多的杂合细胞系克隆体中,每一个都有不同数量的染色体片段,筛选生长后,就可以形成一套杂合组,供接下来的制图实验用了。
如果要在一个放射性杂交组中对一个STS作图,那就要将每种杂交组细胞系中的DNA进行STS的PCR操作。细胞系中如果含有该STS的染色体片段,那么就能得到一个正的PCR信号。在基因组中相邻很近的STS有相似的固位模式(retention pattern),因为放射性引起的断点落在它们中间的几率很小。相邻较远的STS固位模式相似性降低,相邻很远的STS的固位模式将会截然不同。与基因图谱所用方法类似,算法类的软件也能推出STS在放射性杂交图上的相对顺序,并通过断点落在其中间的可能性,用某一距离系统计算相邻标记物之间的距离。放射性杂交图还能提供一个标记物位于某一个特殊位点的可能值(优势对数值)。一个放射性杂交图的分辨率依赖于杂交体片断的大小,而这又依赖于人体细胞系所受的辐射量。一般对基因组大小作图的细胞系分辨率为~1M。
除STS含量图和放射性杂交图外还有几个方法可用于制作人类物理图谱。克隆图谱使用与STS含量图不同的技术来决定克隆体的接近程度。例如,CEPH YAC图谱法(Chumakov et al., 1995)综合利用指纹法(fingerprinting)、间-Alu产物杂交法(inter-Alu product hybridization)和STS含量图法来制作一张重叠的YAC克隆体图谱。缺失和体细胞杂交图依赖于大型基因组重组(可以人工引进或由实验本身引起),从而将标记物放在由染色体断点所限定的bin?中(Vollrath et al., 1992)。FISH图谱(Licher et al., 1990)使用一个荧光信号来探测克隆体的间期DNA扩散时的杂交情况,从而以细胞遗传学图中一条带的位置定出克隆体的位置。
研究者捕捉致病基因时对转录序列图谱有特别的兴趣。这些序列是由已表达序列,和那些从已转化成STS并置于传统物理图谱的已知基因衍生而来的。近来一些制作大量EST(Adams et al., 1991; Houlgatte et al., 1995; Hillier et al., 1996)的工程已经使制图实验室能够得到数以万计的单一表达序列。一旦一个致病位点被鉴定出来后,这些转录序列图谱就能明显加快对目标基因的研究速度。
YAC库可用于STS的排序,但其克隆体中的高嵌合率和高删除率使它们不能用于DNA测序。去年高分辨率、可用于测序的质粒和BAC图谱则发展很快。因为它们所需的克隆工艺水平很低。除了几个特例,如染色体19的Lawrence Livemore实验室质粒图外,其它图谱都还只处在初级阶段。
目录

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大型公用数据库中的基因组范围图谱编辑本段回目录


人类基因组物理图谱信息的主要来源是由NCBI(National Center for Biotechnology Information国家生物技术信息中心)和GDB(Genome Data Base基因组数据基地,见注释)提供的大型公用数据库。这些数据库提供各种图谱的来源,使研究者能够用一个多用户界面交互系统在图谱中进行比较。在一定程度下,这些数据库还能进行图谱的综合及分析。

NCBI Entrez中染色体图谱的使用编辑本段回目录


Entrez的基因组部分是最容易获得物理图谱信息的来源之一。此服务由NCBI所提供。Entrez试图以一种可理解的方式将几种遗传学图谱和物理图谱、DNA和蛋白序列信息、以及一个目录型引用数据库和三维晶体结构信息融合起来。因为它的内部连接多,而且界面简单,Entrez 可作为搜索图谱的一个起始点。
任何支持网络浏览器,如Netscape、Mosaic或Microsoft Internet Explorer的计算机系统都可以使用Entrez。与Internet的连接应支持TCP/IP,通过一个Internet服务提供器就会形成一个有用的网络连接或是一个拨号连接。因为图谱信息中图形很多,所以应能连接28800bp或更多信息。
除人类基因组,Entrez还提供关于鼠类、果蝇、C.elegans、酵母以及一些原生动物的图谱。尽管可比较的(同线性)图仍不可获得,但它代表了现在最大和最完整的一套多生物体的图谱信息。
尽管以网络浏览Entrez对一般的使用已经足够,此来源使用频率高的人还是想建立一个Entrez网站,即NCBI“站柜台”,以顾客--服务员的形式使用软件。这种形式与网络版特征一致,但从实质上可以更好地应用,而且界面美观。它适用于Windows、Macintosh和Unix等系统,并可在Entrez Overview(全览)页上下载。
Entrez也有一定的限制。最严重的是由几种方法构建的图谱不得不使用同一坐标系统。这种简化,满足了将所有表示同一区域的图形同时显示的需要,但有时也掩饰了其图谱信息模棱两可和存在矛盾的特点,制造出并不存在的确定性的假象,特别是细胞遗传学图和物理图片、基因图谱的整合关系并不紧密,必须小心使用。当然,Entrez也和一些实验室制作的网页相连,它们提供图谱来源,这就使图谱能够保持实验室最常用的最新的形式。这些个体中心的图谱将在后面作更详细的介绍。
在GDB中浏览染色体图
另一种常见的人类物理图谱数据的来源是GDB。尽管GDB是基于当时基因图谱的重要性才构建起来的,但是最近几年来,GDB也已经进行了扩建重组,现在同样可以算是物理图谱数据的仓库。不象NCBI,GDB只限于人类图谱数据。它不含序列数据,也没有其它种类生物的信息。
同NCBI一样,GDB可以由WWW上得到。GDB提供了一种全功能的对其数据库的查询式界面,这一点,尽管很有用,对新手来说可能还是会很头疼。限制性更强的查询界面,包括一种“按址查图”的功能,能帮助你更直接进入GDB,特别是在1996年12月引入的GDB的视图-2程序(Mapview 2 program),它利用新的Java微程序(applet)技术提供了一个与GDB中的基因图谱和物理图谱相连的图形界面,并使网页能够合并“活性内容”(active content)(Anuff, 1995)。一个能使用Java微程序的网络浏览器应服从以下规则:它们应含有Microsoft Internet Explorer(3.0版本或更高)和Netscape Navigator(2.0版本或更高)。
来自个体来源的基因组范围图谱
尽管一级数据库,如Entrez和GDB是已发表的图谱的重要来源,但是它们还没有能替代原始数据的东西。有能力制作自己的物理图谱的实验室一般都有自己的网址,连向它们的图谱数据库。通过从这一渠道直接获取资料,我们可以看到制图实验室所使用的图的形式、下载原始数据、并且了解实验室制图时的协议。另外,一些图在出现于Entrez和GDB前经常被丢掉。Entrez和GDB数据库选择的表达方式,对那些希望将新的标记物定位于已知物理图谱上的研究者来说,只提供了最小的帮助。
人类基因组的转录物图
在1996年10月,Horno sapiens的一个全基因组转录物图由一个国际合作的研究实验室发表于Science上(Schuler et al., 1996)。这个图由~15000个不同的表达序列组成,由放射性杂交法定位,与Genethon基因图谱衍生的框架相近。通过对酵母人工染色体作STS含量法又增添了1000个表达序列。在这张图中,大约1/5的标记物有已知的或是假定的功能,而余下的代表了未知功能的表达序列。制成图的序列一般由UniGeneset衍生而来,它是一个由NCBI管理的公用重复ESTs数据库。
转录物图是通过将八家不同实验室的图谱数据综合而得到的。为协调制图方法的些微不同,表达序列被放在由Genethon基因图谱衍生的框架上。结果,该图的最大分辨率为~2cM。很多情况下,可以从各个实验室的数据库里得到针对某一部分数据更好的制图信息,特别是the Whitehead Institute和Stanford University的。
浏览NCBI转录物图
转录物图可在两个网址上得到。数据的“亲本”站点为NCBI。在那儿可以找到含有全基因组转录物图的Science文章的全文,以及彩色的图象,但一般都只有装饰性的墙面图案。另外,也有搜索页可以让浏览者对特别感兴趣的基因进行查询,或是通过对功能未知,但其读码框与某已知功能的蛋白质相近的表达序列图谱进行搜索。
NCBI网址的一个限制就是它不能在低分辨率标记物分布柱形图上提供转录物图的图形。但是通过Mapview微程序就可以得到其图形显示。从GDB的首页,沿着What’s New的链接,可找到全基因组转录物图(到本书出版时链接形式可能已有所不同)。同样,可以认为转录物图也是Entrez网将要制作的一部分。
任何支持网络浏览器的计算机系统都可用来浏览NCBI转录物图,要求是应连向Internet并支持TCP/IP。通过Internet服务器可能形成一个dedicated网络连接或是一个拨号连接。因为这个网址图形不多,所以连接速度不要求很快。
首先,点击Science转录物图网页所在的浏览器,得到转录物图的主页,通过其鲜快的桃红背景很容易认出它。现在,寻找并点击标有Reasearch Tools Page(研究工具页)的链接。一般这个链接很不起眼(它在该页的右方,图的下方),这个链接会引向一个有几种搜索方式的窗口,你可以按址、按假定功能或只按序列进行搜索。
要想搜索基因组的一个特定区域中特殊目的基因的图谱,可选择标有Map Search(搜索图谱)的链接,得到含有一列染色体的页面。选择感兴趣的染色体,得到与图12.7相似的页面。现在,在标有Interval(间隔)栏中,输入两个Genethon基因标记物来定义你感兴趣的区域。
Genethon图可从GDB得到,或直接在上面所给的URL上的Genethon中得到。
每个转录物的名称都是一个超文字链接。选择此链接会产生一个页面,对转录物进行详细说明。在可获得信息中有重叠基因表、形成转录物群的ESTs、cDNA的准备原始材料,转录物的克隆ID(在I.M.A.G.E Consortium的网页可得到大多数ESTs的克隆号)、Swiss-Prot相似性搜索结果,以及Entrez中关于其序列和词条信息的链接。
要想根据名称或假定功能搜索一个图中的转录物,应回到搜索页并选择Text Search(主题搜索)。接着会弹出一页,上面有一个或多个搜索项。你可以搜索以下类型的内容,GenBank中的一个通道号、一个标记物或地点名称、在转录物GenBank词条的说明区内找到的一个说明性词语、或是在Swiss-Prot词条的说明区内找到的说明性词语,转录物与之很相似。你可以同时限定很多搜索项,这样搜索系统会挑出含所有项的那些词条。
按Search搜索键提交搜索,将会出现一列符合条件的转录物,其形式与前所述搜索的图谱相似。例如搜索kerabin(角蛋白)通常会得到17种keratin和与keratin相似的转录物,并指出它们在图中的位置。
搜索的最终类型取决于BLAST相似性,如要搜索与一段DNA序列相似的转录物图,在搜索页上选择“序列搜索”,弹出一个很大的输入区。用FASTA模式将目的序列剪切后粘贴在输入区;先在>后加上序列名称(任意标记物均可),再加入该序列。
White head Institute提供的人类物理图谱
The Whitehead Intitute/MIT Center for Genome Research是两张基因组范围物理图谱的最初来源。其中一张是STS含量图,内含指定为YAC的10000多个标记物,以及一张含12000个左右标记物的放射性杂交图。Whitehead所用的G4杂交板(Genebridge 4 radiation hybrid panel)分辨率为~1Mbp,而以YAC为基础作的图分辨率大约为200kbp。这些图已经和Genethon基因图相结合,产生了一张合图,在平均150kb范围内有20000个STSs。Whitehead图上大约有一半的标记物是表达序列,它们在人类转录物图上也会出现。
WI(Whitehead Institute)图可通过网络从Whitehead Center for Genome Research的主页上得到。沿着“人类物理图项目”(Human Physical Mapping Project)的链接就可以得到感兴趣的图,这些图可通过几种方法浏览。选择一系列pop-up菜单可以产生所选染色体的图,选择选项按钮可以综合放射性杂交图、STS含量图和基因图。与Entrez一样,这些图不是固定不变的。点击一个STS或是重叠群,会弹出关于该图素详细信息的页面。图形式图谱在网址上可按GIF或Macintosh最初模式(PICT)下载。最近引入的一个多图浏览器,有一个望文生义的名称Multimap(多图)可以为Java型浏览器(如图12.8)提供这些图详尽的信息。这些图的后转录形式在Whitehead FTP站点上也可得到。但应注意,这些后转录图是一些长几英尺,与墙壁差不多尺寸的怪物。这就需要一个有足够内存(至少8M)的激光打印机或标绘器才能进行硬拷贝。
Whitehead网址上还提供了对图谱数据库进行查询的搜索页。这些搜索数据的链接可按名称、GenBank通道号、STS型号、染色体分配进行搜索。另外,Whitehead网页也可根据功能关键字搜索制图转录序列,并提供与NCBI中的主转录物图的链接。
Whitehead也为那些希望建立他们自己的STS 的研究者提供服务,并将之放在一个或多个图上,这些服务包括:
一个在线的引物选择程序,引物3

将一个STS放在STS/YAC含量图上的服务编辑本段回目录


将一个STS放在放射性杂交图上的服务
Whitehead图远未完善,对合图进行监督性测试就能显示出在基因图、放射性杂交图和STS/YAC图上的STSs位置间存在矛盾。这些矛盾表现在合图上仍存在交叉线。解释这些图的一个关键点在于理解这些图在可靠性与分辨率水平不一。基因图骨架在数十兆时能可靠地连接标记物,但在低于约2兆时就无法准确解决两个STS的顺序问题了。放射性杂交图能够测知约10Mb的连接,有效分辨率达~1Mb(更小的间隔也能排序,但是不可靠性逐步增加)。STS/YAC图可以测知两个相互间隔1Mb的STS的连接,估计分辨力达100~300kb。理解图谱时头脑中应有这些尺度上的差异。一般在1Mb的范围以下,STS/YAC图是说明顺序的图谱中最可靠的一种。
在STS含量图中,由于STS和YAC的不等分布,可靠性也会有地域差异。在YAC密集的区域(每一个STS有5个或更多的YAC),在排序信息的重要性上,图谱结果是相对更可靠的。在低密度区,图谱结果中就会有几种同时可能替代的STS顺序,并会附上数据。假定的错误的反面情况,如图12.8中,表示为图中的空白框。这一点也会严重降低图谱的准确性。最后,因为在所有YAC库中都存在嵌合现象的问题,双键(例如,一对STS同时与2个或更多YAC连接)比单键(STS只由1个YAC连接)更能可靠说明相邻关系。尽管只有在基因图或放射性杂交图中存在支持性数据时,图上才能构建单键信息,但单由两个STS相连形成的连接仍保留怀疑。这些元素在任何制图区域被详细检查的时候都应考虑在内。
下面的部分介绍如何在Whitehead图上,通过Whitehead网址安置新的STS。从STS设计和针对Whitehead和放射性杂交图进行制图开始。
设计一个STS,置于Whitehead上
设计一个STS需要一个高质量的DNA序列,至少长达所需的PCR产物。为得到最好的结果,这些序列应不含重复元素和载体序列,并且质量相对高些。任何支持一个WWW浏览器的计算机系统都可以使用该程序,支持TCP/IP的网络连接也是必须的。
首先,将浏览器连到Whitehead Genome Center的主页。寻找并点击指向WWW Primer Picking的链接。接着出现一页,在其上方有一个很大的输入框。剪切原始序列并粘贴到该处,只用粘贴原始序列,不需用名称或其它标记词。这些碱基可以小写或大写,而白色空格可以忽略。
现在,向下滚动窗口,将PCR的条件调至需要值。那些关于盐浓度、温度和产物大小范围等的默认值均是WI所设定的。如果有必要的改变需输入时,按标有Pick Primers键返回一套引物处进行特定设定。这些引物现在在对感兴趣的序列的审查实验中用得上。通过放大基因组DNA中的一条特定带,可以对这些引物的能力进行经验性鉴定。引物的失败主要与引物扫描区域中的重复元素有关。相反,通过进行BLAST或FASTA搜索,再选择引物对,来对输入序列中的重复序列进行筛选则是比较明智的,如果STS成功地放大了一条特定带,它就可以与Whitehead STS/TAC含量图或放射性杂交图相联系,被制成图。

与Whitehead STS/YAC含量图联系对STS制图编辑本段回目录


一旦被制出后,一个STS就可以通过对CEPT mega-YAC库的扫描确定在STS/YAC含量图上的位置。而对含有超过30000个克隆,其中又有1200个排列、板块和柱池(row、plate和column pool)的YAC库进行搜索,实在是一件头疼的任务。可喜的是,几个生物技术公司已经提供了CEPH YAC的复本和(或)筛选系统,包括Research Genetics Corporation。Whitehead图就是仅从YAC库的后一部分构建起来的。这意味着库模块中位于709-972的范围仍需筛选。STS接着就可以用以下步骤放在图上了。
使浏览器连向Whitehead的主页,并点击标有Human Physical Mapping Project的链接以跳到该组织的物理制图页。从这儿,再找到并选择“Search for a YAC to its address”,接着出现一页,内有一系列pop-up菜单,能用于输入单个YAC的地址、或一个输入单个YAC名称的主题栏、或一个能粘贴一列YAC地址的大型区域。后者适用于将多个YAC用于研究的时候。在这个地方输入YAC列表,再使用“plate_row_column”形式,这里是用“_”号分离板块、排和列这三维(如709_A_1),也可输入多个YAC地址,用空格或carriage回车隔开。搜索过程输入格式并不固定,它也可识别多个YAC模式(包括709_a_1和709a1)。
当YAC表完成后,按Search键,得到一个表,列有各个YAC,其重叠群位置和染色体分配,以及附近STS的位置。这些STS位于放射性杂交图和(或)基因图上(见例1)。
要理解该搜索结果,应该知道CEPH库中相当数量(40-50%)的克隆都是嵌合体,这意味着单个YAC可能存在于位于基因组不同部分的重叠群中。由于这个原因,需要找到多个YAC来证明单个STS分配到了某一特定重叠群中,或是从其它方法来证明(比如FISH,体细胞杂交制图,放射性杂交图制图数据)。

Whitehead放射性杂交图编辑本段回目录


STS也能被置于Whitehead放射性杂交图中,这比STS/YAC含量图的问题简单很多,因为在放射性杂交图上搜索一个STS只用93次PCR,而不是1000次。Whitehead放射性杂交图使用Genebridge 4 radiation hybrid panel。与CEPH YAC库一样,这些细胞谱系的DNA也可以从一些生物技术公司那儿得到。而有些公司还提供搜索服务。为得到最好的结果,PCR必须在与制作Whitehead图的相同条件下进行(见Hudson et al., 1995),并应在复制时进行。复制PCR间出现的不同结果说明应继续重复或以未知物对待。

Stanford University放射性杂交图编辑本段回目录


Stanford Human Genome Center已经用G3制图板发展了一张基因组放射性杂交图。由于比G4板所用放射量更高,G3板的分辨率更高,但是代价是在探测长距离连接时限制很大。Stanford图一般在平均375kb的范围内存在~8000个STS,这些标记物中,3700个左右是表达序列,存在于NCBI转录物图中。同以往一样,在基因组很多部分中,Stanford图中的表达序列比“全包容”NCBI图中的准确性更高。
Stanford图可用WWW接通。在主页中点击Mapping再点击RH Mapping,这样就可以得到基因组放射性杂交图。在这儿,标有Maps的链接可以引向一页,帮助用户选择所要演示的染色体。这个网址接着就会演示所选染色体的一个表意符号、一个密度图,指明每个制图标记物的位置、和一列用于构建该图框架的Genethon基因标记物(图12.9)。点击一个基因框架标记物的名称将会得到该地区标记物的一个详表。选择一个标记物的名称又会得到该标记物和其制图数据的更详细的信息页,通过搜索页可以得到特定标记物的位置。允许的搜索项包括:标记物名称、GB通道号、GDB位置鉴定和dbSTS数量。
Stanford提供一个放射性杂交图制图服务器。如同Whitehead服务,这个服务器允许对从Research Genetics和其它业主处得到的G3板进行STS扫描。输入数据,服务器将会尝试将STS与Stanford图相连,并用Email返回结果。因为G3板不能探测长距离连接,在无其它图谱信息时,Stanford服务器只能将75%的STS定位在一条染色体上。但是如果要在可选区域内提供标记物的染色体分布。服务器就能够在一个低优势对数连接值时进行分析,并可对90%的情况作出分布图谱。
当使用PCR时,STS应对83G3板DNA扫描。为得到最好的结果,可使用Stanford的RH Protocol主页给出的PCR协议,每次分析结果都应该复制,并且复制品间有分析差异就应该重复或标为未知。
Stanford服务器返回的制图结果由一系列相应的标记物分布组成。对于每一个STS,服务器都会报告离其最近的基因标记物、染色体、和标记物到STS的距离,以centiray(cR)为单位。尽管对于制图结果并不提供图形显示,图谱信息还是可以用来与以上讨论的浏览图形结合来说明所提交STS相对于Stanford图上其它STS的位置。

CEPH YAC图编辑本段回目录


1993年,巴黎的CEPH(Centre d’Études du Polymorphisme Humain),与Genethon合作,发表了人类基因组的第一张物理图谱(Cohen et al., 1993)。这张图由几套重叠YAC组成,形成连接邻近基因标记物的途径。YAC重叠可由几种技术鉴定,包括YAC指纹印迹法(YAC fingerprinting)、与inter-Alu PCR结果杂交法、荧光原位杂交(FISH)和STS含量图。尽管YAC克隆图大部分已被更方便的以STS为基础的图谱替代,对于要包括CEPH YAC库或以克隆为基础的反应物的制图项目还是有用的。
由于YAC库中的高嵌合率,在两个通过指纹法或inter-Alu PCR杂交法确定相互重叠的YAC之间,每一小步可能都很可能跨过基因组的一个物理距离。基于这一点,短距离比长距离更可靠,这一概念已植入CEPH的词条“level”中。一个1级(level)途径,由两个锚定STS组成,它们应至少有一个YAC直接连接。这类途径,与平面STS含量图中用于确定相邻关系的键或单键相类同。可以让研究者从一个STS跳到另一个,而无需跳过任何YAC/YAC连接点。相反,一个2级途径,由两个锚定STS组成,不直接由单个YAC连接,而是由inter-Alu PCR或指纹法确定在包含它们的两个或多个YAC间有一个重叠,所以2级途径需要跳过一个YAC/YAC连接点。3级途径需跳过2个。4级需跳过3个,等等。尽管每一种的可靠性尚未经验性证明,通过对一套CEPH数据的分析(J. Orlin, personal communication)暗示4级或更高时可能不精确。而幸好CEPH途径中近90%的基于间距为3级的或更低。

从CEPH服务器得到YAC重叠编辑本段回目录


CEPH图可以在其单位的网址上在线获得。这里可找到的链接有YAC库信息,也有一系列图谱的后转录文件,用于制图的QuickMap软件,以及含原始图谱数据的文件。浏览CEPH图最好的作用方法为下载QuickMap文件,安装并利用它来观看数据文件。然而,由于QuickMap只对Sun workstations工作,这种方法已经不可行。CEPH也提供针对QuickMap的一种在线界面,在通过标有Infoclone的链接处可以获得。这时会弹出一页,可以提交一个STS、或一个基因标记物或一个YAC的名称。提交名称后会回执所有关于它的原始图谱数据。该文本是超链接,可以从一个YAC的单一inter-Alu PCR杂交跳至另一个。
要得到数据,将浏览器连到CEPH的网址上。这会弹出ECPH Genethon网页。现在找到并选择I链接,接下来的一页会要你在一个小文本栏中输入一个YAC或一个STS的名称。YAC应遵循简便的plate_row_column(板块_排_列)格式,如923_f_6。对于STS,可以用GDB分配的D-片断名(如果可得的话)或是实验室分配的研究名称。该文件只针对特定事例,所以输入AFM20ZE3不会得到正确的名为AFM220ZE3的STS。也应注意YAC地址中排的名称应小写。
按下Query(查询)键,如果该名称存在于CEPH数据库中,那么在短例例2中含相似信息的页面将会出现。第一部分包括一些关于STS的总体信息,如引物序列和基因图谱信息。第二部分给出STS的YAC搜索数据。该部分列表中的所有YAC通过直接PAC扫描均发现含有该STS,注释Alu-PCR probe(探针)说明这个YAC在inter-Alu PCR杂交实验中被选用为探针。第三部分包含与STS相邻的YAC的信息,它们与STS相隔一个inter-Alu PCR的距离。
为得到一个YAC上的制图信息,可在文本栏输入其名称并按下Query键,出现的界面将会给出YAC、FISH和STS含量图数据的尺寸信息,以及inter-Alu PCR和指纹印迹实验中衍生出的重叠信息。

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