1、培养液用的GIBCO的RPMI-1640。里面加10%小牛血清，青霉素+链霉素。消化时用0.25%胰酶。

2、我都是1640配营养液时现加血清和双抗，血清分装后直接由-20度到37度水浴箱中溶掉，没发现血清有沉淀现象。总体积100ml的培养液：90ml1640+10ml牛血清+1ml双抗，无其他物质了。培养过程中没发现有什么问题。

3、传代时，先吸掉培养液，我都不用倒掉的方法，怕由于瓶口而污染，都是慢慢吸管吸出的。然后培养液略微冲洗一下，加胰酶，倒置显微镜下见80%细胞变圆后，吸出胰酶，培养液终止消化。吹打下细胞，按所需稀释比例传代。我现在的CHO细胞状态不是很好，但是疯长，不知道为什么。所以每次传代时，我都是留一滴足够，差不多能稀释20倍了。