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16HBE14o-细胞株的传代

标签: 16HBE14o- 细胞株 传代

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此种细胞的培基最好用是DMEM!以前我们用1640,但生长及其缓慢。

正常情况下,2天换一次液,4-6天传代一次.

传代过程:

1、直接倒掉DMEM培基

2、pbs将细胞洗2次

3、倒掉pbs

4、加入0.25%胰酶(0.02%EDTA)1-2ml/培养瓶

5、水平放置培养瓶,消化3-5分钟

6、显微镜下观察:细胞形态变圆,而且细胞间界限明显后,或有极少数细胞漂浮起来就可终止消化。

7、加入完全培基/血清中止消化(我的做法是:不倒掉胰酶)

8、吹打:动作要快。按一定的顺序进行吹打,尤其是边缘和角落往往是16HBE14o-细胞长得最密的地方。如果不吹打彻底,会对下一次的传代造成影响。吹打时,我个人比较喜欢用较大的吸管,这样的话液体就很难进入倒吸耳球,减少污染的可能。

9、补足培养基,如有多瓶传代,移至同一培养瓶内,混匀细胞,分装传代。

如果急着做试验的话,通常1传2。如果不着急试验,通常可以1传3或者4。

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