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问： 我是新手，我想将一个构建的真核表达载体转染进HEK293细胞中，有人说要先将质粒线性化，也有人说不用，不知道到底应该怎样呢？如果需要线性化，具体怎么操作呢？谢谢了！ 答： 要看你的目的，是做瞬时表达还是稳定表达，做稳定表达，为了更好的整合到细胞的基因组上，可将质粒线性化，选择好酶切位点。不酶切直接筛选稳定表达也可以得到结果。293转染效率还是较高的，一般不用稳定筛选。 |
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