1、用流式细胞术测血浆中的内皮源性微粒,已购买荧光标记的抗体(PE ANTI -CD144),已文献证实这种微粒表面表达CD144,且具有特异性。但检测了两次均无特异性,不知道是否标本处理有问题。 回答:EMP;CD31、CD42。 因为EMP大小在1um左右,所以FS的消减滤片最好在检测时取掉,在此基础上还要将默认的检测触发信号(FS PEAK)阈值(discrimination)作相当大的下调(例如机器就是将默认100下调到25~35),否则有可能收不到多少信号。 流式检测环节来说,因为EMP比一般的细胞直径小了一个数量级,所以其散射光信号很弱,如果常规通过消减滤片并且采用默认触发信号阈值的话,可能很大部分(或者绝大部分)EMP过来的散射光都没有办法触发检测系统的获取过程,所以就没有信号了。 其实EMP的检测一般的流式细胞仪都能完成,没有必要对仪器本身失去信心。关键是要跟操作员沟通好,反馈一下,操作员应该能够理解和进行调整的,毕竟插拔一块滤片是易如反掌的事情,调整阈值参数就更加简单了。 3、和操作员沟通,她说消减滤片她们不会取。她们一般不会动机器上的部件。她答应再帮忙做一下。并说想看一下图。机器的型号待问。 以1um乳胶微球标示大小范围 特异抗体染色检测:
4、机器的型号是BECTON DICKSON FACsort 应当怎样调整? 很不幸,咨询过BD和BC两个公司的应用工程师了,FACsort的前向消减滤片是固定而非可插拔的,而且封在模块内部,基本上不合适取下来了。在不取掉前向消减滤片的情况下,FS PEAk阈值降到0都没有办法触发有效的目标信号,徒增背景噪音而已,没戏了。作者现在在用的机型BC的ALTRA。 5、机型分别是BD LSR2,和BECTON DICKINSON FACSCalibur 。能做吗? BD的机器似乎只有最新的Aria的前向消减滤片是可以自由取下来的,其它机型可能都不可以。保险的做法先问问那些单位的操作员,前向消减滤片可否取下,这是最关键的,可以的话参数调节就应该都没有问题的。 ? ? |
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