1、原理与方法 基本上和C4高压电泳及免疫固定技术一致,样本不需经神经氨酸酶和羧肽酶B处理,电泳时直接加10uL EDTA抗凝血浆。凝胶板规格为125mm×260mm×3mm,电泳时电压控制在85mA,时间3~4h或血红蛋白迁移至离加样孔5.5em处时,停止电泳。用1:4或1:2稀释的抗Df血清(AtlanticAntibodiesTATB,USA或上海长征医院产品)进行免疫固定。依照Mauff提出的BF定型图命名。 2、所需试剂 (1)巴比妥缓冲液 巴比妥34.56g,NaOH6.00g,乳酸钙1.23g,加蒸馏水至2L。此溶液为电泳缓冲液; (2)1%琼脂糖的配制 称取1.0g琼脂糖(1CN或SEAKEM.M.E)加巴比妥缓冲液66mL,然后加蒸馏水至100ml,隔水煮沸或微波炉中加热至琼脂糖完全溶解透明为止。 3、操作 同C4免疫固定(具体可查看http://tong.biox.cn/admin/article.do?action=Preview&id=5646)。 |
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