一、柠檬酸钠法

1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠（pH6.0）的容器中。

2. 微波中高火6-8min。

3. 室温冷却。

4. 用PBS洗涤3次，每次5min。

二、蛋白酶K法

1. 配制新鲜溶液：

25μl 20mg/ml蛋白酶K；

2.5ml 1MTris-HCl（pH8.0）；

0.5ml 0.5M EDTA（pH8.0）；

加水定容到50ml。

2. 37℃下，将玻片放在架子上孵育5min（蛋白酶K不要预热）。

3. 用PBS洗涤3次，每次5min。

三、尿素法

1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml 的1M尿素（新鲜配制）的容器中。

2. 微波10min，20min或者30min，每5min补充一次蒸发掉的水。

3. 冷却30min到1h。

4. 用蒸馏水洗涤4次，每次3min,再用PBS洗涤3min。