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标签: 体液免疫功能 检测方法 补体 免疫球蛋白 免疫复合物 细胞因子

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一、补体测定

1、血清总补体活性测定

当兔抗羊红细胞血清与羊红细胞结合后,遇到补体即可使羊红细胞发生溶血,依据这一特点可建立测定血清中总补体活性的方法。

当血清的效价和绵羊红细胞浓度保持一定的情况下,在规定的反应温度和时间内,溶血程度与补体量呈正相关。因此,通过测定溶血程度,即可测知补体的含量。目前常用的方法是用 50%补体溶血试验(CH30)测定总补体活性,即求出使50%致敏羊红细胞发生溶血时的血清最小用量。以CH50单位/ml表示。

2、补体旁路途径活性测定

用于人和动物血清补体旁路途径活性的测定,其依据是未致敏的家兔红细胞可以激活B因子,引起补体旁路途径活化,导致兔红细胞溶解。此法是将一定浓度和容积的新鲜家兔红细胞悬液与不同量的待检血清混合,作用一定时间后观察溶血反应。根据引起50%溶血所需的最小补体量,计算出待检血清补体旁路途径的活性,以ACH50单位/ml表示。

3、补体组分测定

目前已能对所有的补体组分进行提纯、鉴定和制备相应的特异性抗体,并对多种补体组分及其裂解产物进行定量测定。常用的方法是单向免疫扩散(SRID)或火箭电泳法。现已建立更为灵敏、快速的免疫比浊法、酶联免疫吸附试验(ELISA)及放射免疫测定(RIA)等方法。

二、免疫球蛋白测定

1、用已知抗原检测相应抗体,如各种感染性疾病的辅助诊断和流行病学调查等。

2、通过免疫动物或单克隆抗体技术制备特异抗体,对Ig进行定性或定量测定,以及用于与Ig异常的有关疾病的诊断,如免疫缺陷或免疫增生病。

三、免疫复合物检测

1、组织内的IC检查

对于组织中沉积的IC的检查,常用的方法是将待检组织切片以荧光素、酶或全溶胶标记的抗体进行免疫组化染色后镜检。通常是用标记的抗球蛋白抗体或抗C3抗体检查IC中的Ig或补体成分。

2、体液中循环IC检查

(1)抗原特异性方法 通过区别游离的抗原和与抗体结合的抗原,选择性测定含有某种特定抗原的IC;在疑为由某种抗原引起免疫病理反应的特定疾病时,可用此类方法分析IC中的抗原成分。较为常用的方法是先用PEG沉淀检品中IC,再与吸附特异性抗体的富含A蛋白的葡萄球菌(SAC)作协同凝集试验进行抗原检测。或用特异性抗体包被固相载体,吸附检品中IC分子上的抗原,用ELISA法进行测定,但应同时设已知阳性对照。

(2)抗原非特异性方法 此法不考虑形成IC的抗原物质,并且检测方法多种,如:物理方法,分子受体法,细胞受体法。

四、细胞因子检测

常用的细胞因子检测方法有两类,即生物学活性检测法、免疫学检测法。

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