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凝集吸收实验

标签: 凝集 吸收 试验

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一、原理

肠道杆菌中的许多细菌都有部分相同的抗原结构。因之一种细菌可与另一种细菌相应的抗血清发生交叉凝集反应。用一种过量的细菌抗原与发生交叉凝集反应的抗血清相结合。可将其共同抗体吸去,剩下抗体只能与特异性抗原起反应,这种实验即称凝集吸收实验。

利用凝集吸收实验可制备单价因子血清,以进行细菌抗原结构的分析及鉴定菌型。

二、材料

1、免疫血清:1:10稀释伤寒杆菌免疫血清。

2、菌液:肠炎杆菌菌液,伤寒杆菌菌液。

3、试管、吸管、毛细吸管。

三、方法

1、1/10稀释伤寒杆菌免疫血清分别与肠炎杆菌与伤寒杆菌进行玻片凝集,可见伤寒免疫血清与两种菌均有凝集,说明二菌具有共同抗原结构,故发生交叉凝集反应。

2、将一定量的肠炎杆菌菌液加入1:10稀释伤寒杆菌免疫血清中,放37℃水浴箱中作用2小时,取出后离心沉淀,吸取上清夜,弃去沉淀。

3、将吸收过的上清夜与稀释肠炎杆菌菌液做玻片凝集,观察结果。如仍有凝集时则将此上清夜再加浓肠炎杆菌菌液进行吸收,方法如上。

4、重复吸收过的上清夜分别与稀释肠炎杆菌及伤寒杆菌菌液进行玻片凝集。如与前者无凝集而与后者有凝集,则表示伤寒杆菌免疫血清中的抗肠炎抗体已被完全吸收。

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