1、目的: 保证Roche E1010全自动免疫分析仪的正确操作,保证检验结果的准确可靠。 2、适用范围: 临床血液实验室 3、项目名称: 血浆肌钙蛋白T(TNT),血浆肌红蛋白(MYO),血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)。 4、项目方法: 电化学发光法 5、原理: 双抗体夹心法。 5.1 血浆肌钙蛋白T:人血清中血清/血浆肌钙蛋白T与其相应抗体(生物素标记和三联吡啶钌标记的抗TNT单抗)在反应池中相遇,形成双抗体复合物。加入链霉素包被的微粒子后,这个抗体复合物与微粒子结合。当输入到流动池后,由于磁性的作用,微粒子被捕获到电极表面,未结合的抗体等物质被洗去。化学发光剂三联吡啶钌和电子供体三丙胺(TPA)在电极表面发生电化学发光反应,通过测定发出的光强度,换算出待测标本中抗原的浓度。 5.2 血浆肌红蛋白:人血清中血清/血浆肌红蛋白与其相应抗体(生物素标记和三联吡啶钌标记的抗肌红蛋白单抗)在反应池中相遇,形成双抗体复合物。加入链霉素包被的微粒子后,这个抗体复合物与微粒子结合。当输入到流动池后,由于磁性的作用,微粒子被捕获到电极表面,未结合的抗体等物质被洗去。化学发光剂三联吡啶钌和电子供体三丙胺(TPA)在电极表面发生电化学发光反应,通过测定发出的光强度,换算出待测标本中抗原的浓度。 5.3 血浆肌酸激酶:人血清中血清/血浆肌酸激酶同工酶与其相应抗体(生物素标记和三联吡啶钌标记的抗肌酸激酶同工酶单抗)在反应池中相遇,形成双抗体复合物。加入链霉素包被的微粒子后,这个抗体复合物与微粒子结合。当输入到流动池后,由于磁性的作用,微粒子被捕获到电极表面,未结合的抗体等物质被洗去。化学发光剂三联吡啶钌和电子供体三丙胺(TPA)在电极表面发生电化学发光反应,通过测定发出的光强度,换算出待测标本中抗原的浓度。 5.4 加入试剂R1(生物素标记的抗TNT/MYO/CK-MB单抗)、试剂R2(三联吡啶钌标记的抗TNT/MYO/CK-MB单抗)和样品,孵育9分钟→加入M(链霉素标记包被的微粒子),孵育9分钟→测量光强度。 6、试剂: Roche 公司配套试剂。 6.1 规格 6.2试剂盒组成 R2(三联吡啶钌标记的抗TNT单抗) M(链霉素包被的微粒子) |
6.2.2 R2(三联吡啶钌标记的抗肌红蛋白单抗) M(链霉素包被的微粒子) 6.2.3 R2(三联吡啶钌标记的抗肌酸激酶同工酶单抗) M(链霉素包被的微粒子) 6.3 试剂准备 R1:即用型 6.4 试剂的保存和稳定性: 未打开的试剂盒:2~8℃竖直放置,可储存至有效期末。 打开后在E1010上可稳定8w。 7、其它辅助用品: 反应杯、蒸馏水。 8、分析前处理: 8.1 病人准备:要求患者在安静状态下;晨起的精神、体力、情绪等因素的影响较小,是标本采集的最佳时间;抽取肘部静脉血。 |
8.3 标本稳定性: 注射器、试管要干燥洁净,以避免溶血。 9、仪器: 9.1 仪器名称和品牌:Roche E1010全自动免疫分析仪 10、质控: 10.1 质控品: 11、操作步骤: 11.1 将试剂放入试剂仓,按SCAN键,仪器对试剂进行扫描。 12、参考值范围: TNT 0.000~0.030ng/ml |
13、报告结果: 13.1 标本检测结果自动传入中文电脑,数据经操作者初次审核,初次审核结果后打印报告单,经小组负责人再次审核后发出。 14、临床意义: 14.1 血浆肌钙蛋白:心肌损伤的确定性指标,包括无症状的AMI或有缺血损伤却无明显症状者。发病后3~6h升高,10~24h高峰,10~15d恢复。灵敏度50~59%,特异性96%以上。升高的程度与预后有关。心脏手术后可使cTnT升高,不能区分损伤是否由手术创伤所致。 15、实验性能参数: 15.1 检测范围: 15.2 干扰因素: 15.3 精密度与敏感性: 16、参考书: 16.1 参照最新版试剂说明书 |
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