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标签: 实验动物 采血 基本方法

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采血方法的选择,决定于实验的目的所需血量以及动物种类。

凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。

一、采血时要注意

⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25~28℃,冬季,15~20℃为宜;
  ⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;
  ⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;
  ⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂.

二、取血量与取血部位的关系

1.取少量血

a.尾静脉 大鼠、小鼠
  b.耳静脉 兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊
  c.眼底静脉丛 兔、大鼠、小鼠
  d.舌下静脉 兔
  e.腹壁静脉 青蛙、蟾蜍
  f.冠、脚蹼皮下静脉 鸡、鸭、鹅

2.取中量血

a.后肢外侧皮下小隐静脉 狗、猴、猫
  b.前肢内侧皮下头静脉 狗、猴、猫
  c.耳中央动脉 兔
  d.颈静脉 狗、猫、兔
  e.心脏 豚鼠、大鼠、小鼠
  f.断头 大鼠、小鼠
  g.翼下静脉 鸡、鸭、鸽、鹅
  h.颈动脉 鸡、鸭、鸽、鹅

3.取大量血

a.股动脉、颈动脉 狗、猴、猫、兔
  b.心脏 狗、猴、猫、兔
  c.颈静脉 马、牛、山羊、绵羊
  d.摘眼球 大鼠、小鼠

三、采血动物品种的最大安全采血量(ml)和最小致死采血量(ml)

动物品种

最大安全采血量(ml)

最小致死采血量(ml)

小鼠

0.2

0.3

大鼠

1

2

豚鼠

5

10

10

40

狼狗

100

500

猎狗

50

200

15

60

四、主要的采血方法

1.割(剪)尾采血

当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器((刀或剪刀)割去尾尖0.3~0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。

2.鼠尾刺血法

大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。

3.眼眶静脉丛采血

采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5~1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1~0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。 若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20~25g的小鼠每次可采血0.2~0.3ml;体重200~300g大鼠每次可采血0.5~1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。

4.断头取血

采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2~4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5~10ml。

5.心脏采血

鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5~0.6ml;大鼠约0.8~1.2ml。

6.颈动静脉采血

先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。

7.腹主动脉采血

最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。

8.股动(静)脉采血

先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15~20g小鼠采血约0.2~0.8ml,大鼠约0.4~0.6ml。

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