1. 30%储备胶溶液: 丙烯酰胺(Acr) 29.0g 2. 4×分离胶缓冲液(1mol/L Tris-HCl PH 8.8) Tris 18.17g加ddH2O溶解,浓盐酸调PH 8.8,定容至100ml。 3. 4×浓缩胶缓冲液(0.5mol/L Tris-HCl PH 6. 8) Tris 12.1g加ddH2O溶解,浓盐酸调PH 6. 8,定容至100ml。 4. 10%SDS:电泳级SDS 10.0g加ddH2O,68℃助溶,浓盐酸调PH 7.2,定容至100ml。 5. 5×电泳缓冲液(PH 8.3): Tris 15.2g 6. 10%过硫酸铵(AP):0.1g AP加ddH2O至1.0ml,4℃保存,要在一周内使用,最好新鲜配制。 7. 2×加样缓冲液:2×SDS加样缓冲液 8. TEMED:注意室温较低时TEMED量可加倍,最后灌胶之前再用 9. 转膜缓冲液(Towbin transfer Buffer): 即1×SDS-PAGE 10. 0.0 1mol/L PBS (PH 7.4) : NaCl 8.5g 11. 封闭液: 1×PBS中加入 30ml 12. 漂洗液(PBST):含0.05% Tween-20的PBS溶液 13. 水饱和正丁醇: 正丁醇 50 ml 14. 考马斯亮蓝染色法试剂:一般用G250考马斯亮蓝(蛋白定量专用) 15. 丽春红S染色色法试剂:2%乙酸, 16. Aprotinin:为一58氨基碱性多肽,经反复冻融后,会发生集聚,储存液应分装成小份,保存于-20度,每一小份用后应予废弃。 17. PMSF:在溶液中不稳定,应在临用前从储存液中现加于裂解液中。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量的水冲洗。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。PMSF通常配成10mmol/L浓度储液(1.74或17.4mg/ml溶于异丙醇中)保存于-20度。 18. 显色液:联苯胺显色液(DAB) 19. 三去污裂解缓冲液 |
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