问 题
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可能原因
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建议解决方法
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推荐电压条件下电泳时间过长
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电泳缓冲液过稀
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配制新鲜缓冲液,使用1X稀释液
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推荐电压条件下电流过高,热量过大
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电泳缓冲液过稀
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配制新鲜缓冲液,使用1X稀释液
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推荐电压条件下电流过低或无电流
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接触不良
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在电泳前移除胶盒底部的封条;
确认缓冲液没过加样孔;
检查buffer core上导线连接
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蛋白带型条状(streak)
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上样过量 样品中盐浓度过高
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降低蛋白上样量
通过透析或凝胶过滤降低样品中的盐浓度
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样品沉淀
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加大样品中SDS的浓度
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样品中的污染,如脂类或DNA 复合物
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离心或过滤样品以除去特定污染
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制胶不佳
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确保灌胶均匀,一次完成
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条带模糊
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蛋白样品部分变性
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完全变性蛋白
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蛋白样品部分还原
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确保加入足够量的DTT或β巯基乙醇。
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电泳时间过长
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观察前面的指示剂染料,掌握恰当的电泳时间。
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哑铃形条带或
“微笑”条带
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上样体积过大导致不完全堆积
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使用恰当的上样体积,
如果样品过稀,使用超滤浓缩。
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电泳过程中电场不均匀
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如果蛋白浓度已知,上样时确保对称。
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分离胶表面不平
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在制胶时使分离胶表面水平。
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凝胶过期
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在指定的失效期前使用凝胶。
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附件列表
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(尤其在法律、医学等领域),建议您咨询相关领域专业人士。
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