问：最近在回收凝胶柱时（用的是镍柱），经过多次的洗脱液继续平衡清洗，发现还有一些很难去除的杂蛋白，不知应该用什么方法把这些难除的杂蛋白去除？

答：一般用6M盐酸胍+0.2M AC和2%的SDS清洗

一般的柱子都是相同过程，大致顺序如下

1.6M盐酸胍+0.2M AC

2.水

3.2%SDS

4.水

5.乙醇梯度20%-100%-20%，可以任选阶梯型的梯度

6.0.1M EDTA

7.水

7.CHARGE BUFFER

9.水

10.BINDING BUFFER

可以选取其中一部分就行了，不需要每次都做完这个步骤，我认为填料的说明书上应该有写，你可能没注意看