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标签: 超滤技术 应用

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在生物大分子的制备技术中,超滤主要用于生物大分子的脱盐、脱水和浓缩等,并具有成本低,操作方便,条件温和,能较好地保持生物大分子的活性,回收率高等优点。

超滤分离法的典型用途

1.对蛋白质、酶、DNA、单克隆抗体、免疫球蛋白进行浓缩和脱盐

2.药物、激素的分析

3.从PCR扩增的DNA中去除引物

4.去除标记的氨基酸和核苷酸

5.HPLC样品制备

6.样品的除蛋白

7.从生物体液、发酵肉汤培养基中纯化抗生素、激素和药物

8.从细胞悬液、裂解液中回收生物分子

9.对蛋白质、酶、细胞、DNA、生物分子、抗体和免疫球蛋白进行

10.常规意义的实验室浓缩和脱盐

11.哺乳动物细胞的收集

12.清洗细胞、纯化病毒、去除细胞碎片、除热源

浓缩

使用超滤来增加所需大分子溶质的浓度,即大分子被超滤膜截留而小分子和溶剂可自由通过,从而达到浓缩的目的。

梯度分离

按分子大小梯度分离样品中的溶质分子时,超滤是一种经济有效的方法,适用于分离分子量相差10倍以上的分子组分。在超滤过程中,虽然截留的大分子被浓缩,但滤过的溶质分子仍保持初始的浓度。

脱盐/纯化

脱盐即从大分子溶液中去除盐、非水性溶剂和小分子物质的过程。通过换缓冲液,可以最有效地去除溶液中的小分子物质。具体方法为:在溶液进行超滤的同时,不断向溶液中补充缓冲液,补充缓冲液的速度与溶液滤过速度相同,使体系始终保持恒定,这种方法又称透析超滤法。

生物制品

在生物制品中应用超滤法有很高的经济效益,例如供静脉注射的25%人胎盘血白蛋白(即胎白)通常是用硫酸铵盐析法、透析脱盐、真空浓缩等工艺制备的,该工艺流程硫酸铵耗量大,能源消耗多,操诈时间长,透析过程易产生污染。改用超滤工艺后,平均回收率可达97.18%;吸附损失为1.69%;透过损失为1.23%;截留率为98.77%。大幅度提高了白蛋白的产量和质量,每年可节省硫酸铵6.2吨,自来水16000吨。

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