1、在长波紫外灯下切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶, 用纸巾吸干凝胶表面的液体并切小。计算凝胶的重量。 2、加入2-3倍体积的6M KI或NaI(避光4度保存)。 3、温浴, 间断混合,直到凝胶熔化。 4、加适量的振匀的silica悬液(10ul)充分混匀, 冰上放置15分钟(或更长),间断混合。 5、离心3分钟, 弃上清。 6、加1ml预冷的NEW buffer(先用100ul打散沉淀,再用900ul混匀),冰上 洗盐2 分钟,间断混合。 7、离心10s,弃上清。 8、重复6,7步骤1次。 9、于50 ℃烘箱烘干。 10、加10ul的去离子水用枪头打匀,65 oC水浴15分钟,间断混匀。 离心10 s,把上清转移到另外洁净的离心管中 跑胶检测回收效率 注意事项 * 4----8步均在冰上操作,防止解吸附,silica只在低温下对DNA有吸附作用。 * NEW Buffer:(100ml) 去离子水加至100ml.(-20度保存) * Silica配法见: |
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