限制性核酸内切酶 :识别DNA特定序列,切断DNA链 ; DNA聚合酶Ⅰ: 或Klenow 1、缺口平移制作标记DNA探针; 2、合成cDNA的第二链; 3、填补双链DNA3’凹端; 4、DNA序列分析耐热DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶等) 聚合酶链反应(PCR); DNA连接酶: 连接两个DNA分子 ; 多核苷酸激酶 :催化多核苷酸5’羟基末端磷酸化,制备末端标记探针; 末端转移酶 :在3’末端加入同质多聚物尾; SI核酸酶/绿豆核酸酶: 降解单链DNA或RNA,使双链DNA突出端变为平端; DNA端酶Ⅰ: 降解DNA,在双链DNA上产生随机切口 ; RNA酶A: 降解除RNA ; 磷酸酶:切除核酸末端磷酸基 ; 核酸酶: 1、核酸外切酶(exonuclease):是从核酸的一端开始,一个接一个把核苷酸水解下来; 2、核酸内切酶(endonuclease):是从核酸链中间水解3’,5’磷酸二酯键,将核酸链切断。 DNA限制性内切酶 :粘性末端配对重组; 同裂酶:有一些来源不同的限制酶识别的是同样的核苷酸靶子序列,这类酶称为同裂酶。同裂酶产生同样的切割,形成同样的末端; 同尾酶:这一类的限制酶来源各异,识别的靶字序列也不相同,但产生相同的粘性末端。由同尾酶产生的DNA,是能够通过其粘性末端之间的互补作用彼此连接起来的; |
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