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摘要:一、ELISPOT 技术简介随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用, 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,[阅读全文]
摘要:第一天:ELISPOT包被程序,提供两种方案供选择(严格注意无菌操作)一、传统酒精预湿包被程序该方案中,需经过:70%乙醇预湿PVDF膜、无菌去离子水洗涤去除乙醇、拍干,最后,加入已稀释好的包被抗体到各实验孔完成包被操作。具体[阅读全文]
摘要:图注:ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。将指定数目的能产生IFN- 的T细胞与一百万个抗原呈现细胞(Antigen Presenting Cells,APC)混合后,使用ELISPOT 法(上图)、胞质内染法(中图)和ELIS[阅读全文]
摘要:为了实现ELISPOT的标准化,显色最好在恒温箱内进行,温度控制在25°C±5°C,显色25分钟为宜。另外,在37°C显色也是不错的一个方法,但要注意相应的缩短显色时间到12-18分钟,并且显色中勤检查。为了提高ELI[阅读全文]
摘要:酶联免疫斑点(ELISPOT)技术是当今世界上检测生物体细胞免疫水平的最佳技术。它集高灵敏度、高可信度、高通量、单细胞水平、功能性检测与低成本等诸多优点于一身,在国内外免疫学界获得了广泛的应用,成为主流免疫学检测技术[阅读全文]
摘要:透明板在操作的时候比PVDF板稍微容易点,PVDF板在使用时要进行预处理板,操作时还要小心不要把那层膜捅破了。透明板就是显示的斑点都是黑色的,不能进行几种因子的同时测定,而PVDF板就可以用斑点颜色的变化一次来测定几[阅读全文]
摘要:ELISPOT板的主要生产商如:U-CyTech, Millipore, Nunc, BD, Whatman等。目前生产的ELISPOT板包括透明,不透明(白色),PVDF膜等多种类型的板。 国外主要生产商所生产的各类型ELISPOT板都能良好的进行ELISPOT试验。不推荐使[阅读全文]