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SDS法提取植物基因组DNA(图)
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:18
标签: SDS法 植物基因组 基因组DNA

摘要:本方法由Dellaporta,Wood和Hicks(1983)的方法修改而成。其基本原理是研磨的组织细胞用热的SDS裂解后,加入高浓度的KAc,0℃放置以除去蛋白和多糖类杂质,最后用乙醇或异丙醇沉淀。一 材料、试剂和仪器1 材料 新鲜的组织材料[阅读全文]

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SDS碱裂解法制备质粒DNA:小量制备
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:08
标签: SDS碱裂解法 质粒 小量制备

摘要:用碱和SDS处理可以从中度规模(20~50ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的DNA产物可用于电泳分析或限制性内切核酸酶消化,经柱层析进一步纯化之后,还可用于转染哺乳动物细胞。 [阅读全文]

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SDS碱裂解法制备质粒DNA:中量制备
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:08
标签: SDS碱裂解法 质粒 中量制备

摘要:碱和SDS处理可以从中度规模(20~50ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的DNA产物可用于电泳分析或限制性内切核酸消化,经柱层析进一步纯化之后,还可用于转染哺乳动物细胞。[阅读全文]

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SDS裂解法提取质粒DNA
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:08
标签: SDS裂解法 质粒 DNA

摘要:这种温和的方法在处理大质粒(>15kb)时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒DNA混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。 [阅读全文]

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SDS碱裂解法小量提取小麦基因组DNA
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:06
标签: SDS碱裂解法 小量提取 小麦 基因组DNA

摘要:1、取0.1~0.2 g左右小麦叶片于1.5 ml的Eppendorf离心管中,将离心管直接放入盛液氮的冰壶中冷冻。从冰壶中取出离心管,用小玻璃研棒直接插入离心管中迅速研磨,至淡黄色粉末为宜;2、向离心管中加入600 ml的DNA提取缓冲液S,[阅读全文]

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SDS-PAGE实验操作
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:10
标签: SDS-PAGE 实验操作

摘要:试剂:1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇,1ml 1%溴酚蓝,0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液:在通风橱中,称取丙烯酰胺30g,甲叉双丙[阅读全文]

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SDS-PAGE注意事项
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:10
标签: SDS-PAGE注意事项

摘要:1. SDS与蛋白质的结合按质量成比例(即:1.4gSDS/g蛋白质),蛋白质含量不可以超标,否则SDS结合量不足。2. 用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时,必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用。并且[阅读全文]

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SDS-PAGE常见问题分析
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:10
标签: SDS-PAGE 常见问题 分析

摘要:1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响?在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,[阅读全文]

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SDS-PAGE常用参数
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:10
标签: SDS-PAGE 常用参数

摘要: 聚丙烯酰胺的特性,包括机械性能,弹性,透明度,孔径大小取决于T,C,T是两个单体(单体丙烯酰胺和N-N’-甲叉双丙烯酰胺)的总百分浓度,C是与总浓度有关的交联百分比浓度。 T=(a+b)/mC=b/(a+b)(a为单体丙烯酰胺的克数,[阅读全文]

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SDS-PAGE应用
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:10
标签: SDS-PAGE 应用

摘要:SDS-PAGE因易于操作,而具有广泛的用途,是许多研究领域的重要的分析技术。1. 蛋白质纯度分析;2. 蛋白质分析量的测定,根据迁移率大小测定蛋白质亚基的分子量;3. 蛋白质浓度的测定;4. 蛋白质水解的分析;5. 免疫沉淀蛋白[阅读全文]

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SDS-PAGE
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签: SDS-PAGE

摘要:1. To use commercial BRL boxes: Clean the plates with soap and hot water, wipe dry, scrub with ethanol, wipe dry, and clamp them together with spacers in between. The notched spacers interlock to form[阅读全文]

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SDS-PAGE Gels
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签: SDS-PAGE Gels

摘要:Preparation of PAGE gels.1. Clean glass plates with ethanol and assemble casting stand, see Biorad instruction manual2. Mix solutions for lower gel in order shown ie. TEMED last and pour into plates l[阅读全文]

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SDS-PAGE(BIO-RAD)
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签: SDS-PAGE

摘要:SDS-PAGE: gel electrophoresis of proteinsTECHNIQUE is to set up gel plates before you mix the gel mixes. Use the THIN spacers and choose a comb--number of wells varies. Make both resolving gel and sta[阅读全文]

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SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签: SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳 蛋白质 分离

摘要:一、目的要求1.学习电泳原理和技术2.学习和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术二、原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(N,N—methylene-bisacylamid[阅读全文]

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SDS-PAGE Gels(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳)
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签:

摘要:Preparation of PAGE gels.1. Clean glass plates with ethanol and assemble casting stand, see Biorad instruction manual2. Mix solutions for lower gel in order shown ie. TEMED last and pour into plates l[阅读全文]

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SDS-PAGE胶的干燥
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签: SDS-PAGE胶 干燥

摘要: 凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形,但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量,因此,应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态,使其真空压力波动极[阅读全文]

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SDS-PAGE
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签: SDS-PAGE

摘要:SDS-PAGE: gel electrophoresis of proteinsTECHNIQUE is to set up gel plates before you mix the gel mixes.Use the THIN spacers and choose a comb--number of wells varies.Make both resolving gel and stack[阅读全文]

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SDS-PAGE电泳小问答
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
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摘要:Q:SDS-PAGE电泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在[阅读全文]

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SDS-PAGE (PolyAcrylamide Gel Electrophoresis)聚丙烯酰胺凝胶电泳(图)
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:09
标签:

摘要:The purpose of this method is to separate proteins according to their size, and no other physical feature. In order to understand how this works, we have to understand the two halves of the name: SDS [阅读全文]

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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)
词条创建者:admin创建时间:12-09 22:08
标签: SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定 蛋白质的分子量 (垂直板型电泳)

摘要:一、目的: 1.学习SDS—PAGE测定蛋白质分子量的基本原理。 2.掌握垂直板型电泳的基本操作技术。 二、原理: 由实验十五中已知,蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因[阅读全文]

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