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摘要:Description Recent advances in the imaging technique electron microscopy (EM)have improved the method,making it more reliable and rewarding,particularly in its description of three-dimensional detail。[阅读全文]
摘要:1.Cryopreservation of Cell LinesThe aim of cryopreservation is to enable stocks of cells to be stored to prevent the need to have all cell lines in culture at all times. It is invaluable when dealing [阅读全文]
摘要:1.Basic Techniques - The “Do’s and Don'ts” of Cell CultureGiven below are a few of the essential "do’s and don’ts" of cell culture. Some of these are mandatory e.g. use o[阅读全文]
摘要:马歇尔大学的细胞培养培训幻灯,有理论,有实践,是细胞培养上手的一份好教材。特地推荐给准备培养细胞的新人,大家共同学习。点击下载:Growing PLHC1 Cells in Culture.ppt还有“Cell Culture Troubleshooting&rdquo[阅读全文]
摘要:将Caco-2 细胞培养于高葡萄糖(的DMEM培养基中( 1%非必需氨基酸, L-谷氨酰胺(L-glutamine), 培养液含青霉素( penicillin)10,000U/ml-链霉素(streptomycin)10,000ug/ml, 10%胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)),长于T-7[阅读全文]
摘要:1、培养液用的GIBCO的RPMI-1640。里面加10%小牛血清,青霉素+链霉素。消化时用0.25%胰酶。2、我都是1640配营养液时现加血清和双抗,血清分装后直接由-20度到37度水浴箱中溶掉,没发现血清有沉淀现象。总体积100ml的培养液:90m[阅读全文]
摘要:细胞复苏后,在显微镜下观察大约有80%~100%的细胞已经贴壁时用新鲜的培养基换掉原来的培养基,去除DMSO对细胞的毒害,估计复苏到换液的时间为0.5~1.5h。2~3d细胞长满后传代,传代前先把培养基和0。2%的胰酶从冷库放到室温1[阅读全文]
摘要:问:在本版里有看到过有关caspase-3的检测方法(1):免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达,用悬浮的细胞(2):western blot 理想结果:caspase-3有32KD的条带外,还出现了20KD和10KD大小的条带,表明caspase- 3被活花(3):RT-[阅读全文]
摘要:my2230求助CaCl2溶液调PH值用NaoH行吗要配置2.5摩尔每升CaCl2溶液转染细胞,PH值要求7.0,用NaoH调PH值,NaoH加一点溶液PH值就变化很大,并且PH值在几分中后就开始慢慢的向上升,没办法调。是不是NaoH和CaCl2反应所引起的,[阅读全文]
摘要:分子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功[阅读全文]
摘要:1、CHO细胞 CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary),该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是目前生物工程上广泛使用的细胞。全世界批准正式应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程产品约有三十多种,其中只[阅读全文]
摘要:1、问:请问有人养过CHO细胞吗?文献报道说用DMEM培养基来养,但我不太清楚具体是高糖还是低糖? 参考见解:CHO细胞用高糖DMEM养就可以了,比较好养,10%血清,小牛和胎牛都可以,长得比较慢,跟你所用的血清有一定的关系,大概[阅读全文]
摘要:分子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功[阅读全文]
摘要:影响外源基因在哺乳动物细胞中表达水平的因素很多,层次也很广泛,涉及复制、转录和转录后、翻译和翻译后等各级水平,其中mRNA的转录是真核基因表达谓节的基本控制点,它的翻译对表达水平也有一定作用。研究表明,所有提高转[阅读全文]
摘要:存在的问题 在过去的几十年里,人类对动物细胞的培养技术进行了大量的研究开发,取得了很大进展,但是利用CHO细胞表达外源基因的技术水平尚不能满足生物药品的开发和生产的要求,目前上游工作中主要存在以下问题:①构建的[阅读全文]
摘要:Costa_Cell_Culture_for_Ranavirus.pdf[阅读全文]
摘要:yangbinxia:有没有人用脂质体转染过COS-7细胞呀?我看invergen lipofectamin 2000说明书上说这个细胞系转染效率99%,但我用GFP转染后40小时荧光显微镜下观察转染效率没有那么高仅有30-40%吧。可能我的转染条件不太好,我[阅读全文]
摘要:dna2:我研究重组MVA疫苗,构建了survivin和IL-2重组的MVA病毒,并用病毒感染的DC细胞刺激自体T细胞,进行Survivin特异性的杀伤实验。条件如下:外周血分离单核细胞(体外诱导分化为DC)和T细胞为HLA-A2阳性DC与T细胞1:10刺[阅读全文]