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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 配子 DNA 分析

摘要:高等生物遗传图谱的构建依赖于选择性杂交后代的分析或者通过家系分析法来计 算连锁关系。对人类而言仅后者是可行的。使用长度多态性限制片段(RFLPS)在构 建人连锁图谱方面已取得长足的进步。为了对带有与已知表现型相关[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 反向PCR

摘要:描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法,使在已知序列的核心区边侧的未知 DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩 增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 SSCP 现状

摘要:随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现。尤其是PCR技术问 世以后,各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展。如不对称 PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleava[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 SOE SDL 片段拼接

摘要:PCR技术(多聚酶链式反应)是现代分子生物学的一个巨大突破,它能在体外迅速、 大量、灵敏地扩增基因片段。可是,经PCR技术扩增的大量相关基因片段如何能有效 拼接,却是一个很值行探讨的问题。传统的方法是引入限制性内切酶[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 产物 电泳分析

摘要:凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种。 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和 鉴定核酸的方法。琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物。根据琼脂糖的溶解温度, 把琼脂糖分为[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 产物 克隆 方法

摘要:平端连接通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效 率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能 在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为 3'突出一个碱基的DNA[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 应用 进展

摘要:PCR技术自1985年建立以来,发展之迅速、应用之广泛,表明其具有强大的生命力。近些年来,基于PCR的基本原理,许多学者充分发挥创造性思维,对PCR技术进行研究和改进,使PCR技术得到了进上步地完善,并在此基础上派生出了许多[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 扩增 大片段DNA

摘要:一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性通常所用的PCR方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furiosus)DNA聚合酶,具有完整的3'外切酶校读活性(3'-editing-exonuclease),可以将每[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 mRNA 差异PCR

摘要:生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因,而主 基因在某个特定的细胞中,只有占15%的一小部分表达。而且在不同的细胞中,选择性表达的基础也是不同的。正[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 常见问题 对策

摘要:PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 概论

摘要:PCR技术概论 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一D[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 污染

摘要:PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 一、污染原因(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于 密封不[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
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摘要:Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的。yT是一种嗜热真菌,能在70~75℃生长。该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的。 酶活性与热稳定性该酶基因全长2496个碱基,编码832个氨[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR扩增 技术 解答

摘要:1、PCR括增的基本原理PCR(Polymerase Chain Reaction) 是体外高效复制DNA的技术,该技术几乎贯穿于现在分子生物学的各个领域。PCR体系由模板,特异性引物,高温聚合酶,脱氧核糖核酸几部分组成。反应过程分模板高温变性(Den[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 技术 模板 制备

摘要: PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量。模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要。模板处理方法的选择及操作人员的基 本技能,决定分离模板核酸(DNA或RNA)的质和量及PCR的成败。而提[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR扩增 分离 目的DNA 片段

摘要:一、目的了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用,掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 汇总

摘要:PCR反应条件为温度、时间和循环次数。一、温度与时间的设置基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 定义 成分 原理 条件 产物 问题 应用

摘要:PCR定义PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 临床应用 领域 特点

摘要:一、PCR应用特点1、操作简便目前PCR技术采用耐高温Taq DNA聚合酶,并且在有电脑控制的DNA扩增仪中进行,使操作大为简化,一次加入的酶即可满足反应全过程。DNA扩增仪能自动迅速升降温度,只需把反应所需的全部材料混匀,置入[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:28
标签: PCR 进展

摘要:在聚合酶链反应(PCR)的方法建立以前,面院DNA长链上某种基因的变化有很大难度。1983年由Kry Mullis 等利用当时已经发现的DNA聚合酶,首先建立的体外DNA序列扩增法,基本方法是用寡核苷酸引物扩增位于两个已知序列之间的D[阅读全文]

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