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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:27
标签: PCR Taq DNA聚合酶

摘要:Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌,能在70~75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的. (一)酶活性与热稳定性该酶基因全长2496个碱基,编码83[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR cDNA 特异序列

摘要:最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库,然后用抗体或DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因,但建立和筛 选CDNA库是一项非常耗时、费力的工作,而且用寡聚核苷酸作探针进行筛选需[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 测序

摘要:PCR技术代替了为测序而反复进行的分子克隆和模板制备步骤。PCR技术与自动测序技术相结合后,它将成为一种最快、最有效的测定核苷权序列的方法。本章主要综述各种测模板的制备以及如何完成PCR产物的直接测序。与传统的将PC[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 进化分析

摘要:进化遗传学具有两个并列的研究方向:系统发育的重建和种群分析。自1962年,Zuckerkandl和Pauling提出蛋白质序列和基因序列的比较可以象分子种一样用于标志现存物种分化的时间以来,各种生化方法被用于系统发育的研究。在[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 个体配子DNA PCR分析

摘要:高等生物遗传图谱的构建依赖于选择性杂交后代的分析或者通过家系分析法来计 算连锁关系。对人类而言仅后者是可行的。使用长度多态性限制片段(RFLPS)在构 建人连锁图谱方面已取得长足的进步。为了对带有与已知表现型相关[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 反向PCR

摘要:描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法,使在已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR 增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR PCR片段拼接 SOE SDL

摘要:PCR技术(多聚酶链式反应)是现代分子生物学的一个巨大突破,它能在体外迅速、大量、灵敏地扩增基因片段。可是,经PCR技术扩增的大量相关基因片段如何能有效拼接,却是一个很值行探讨的问题。传统的方法是引入限制性内切酶位[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR PCR污染 对策

摘要:PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 一、污染原因(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR技术 概论

摘要:聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 常见问题分析 对策

摘要:PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR基础知识[PCR basics]

摘要:The polymerase chain reactionPCR[PCR: Polymerase chain reaction. A method for amplifying a DNA sequence in large amounts, using a heat-stable polymerase and suitable primers to direct the amplificatio[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 原理

摘要:PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 拓展知识

摘要:1、逆转录PCR(RT-PCR)用来扩增RNA的方法。2、竞争逆转录PCR(competitive reverse transcription-polymerase chain rection C-RT-PCR)低丰度RNA定量的好方法。3、多重PCR(multiples PCR)在同一PCR体系中加入多对引物可用于[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 操作程序 优化方法

摘要:典型的PCR操作在此处仅列出—般PCR操作过程,具体影响因素的优化将在本章第二节讨论,每一个具体操作前都需进行必要的优化。一、 试剂(1)引物根据待扩增DNA不同,引物亦不同,引物的设计见本章第三节。(2)耐热DNA聚合[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 样品处理 注意事项

摘要:一、样品处理DNA是染色体的主要组成部分,是PCR的扩增模板。要进行PCR,研究DNA结构与功能或者用于诊断目的,首先必须从生物体内提取DNA。DNA往往以核蛋白形式存在,其分子量大(人的染色体DNA平均大小为3.0×109bp),提[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 运用 骨肿瘤 诊断

摘要:骨肿瘤诊断需要解剖学、组织学和胚胎学等基础知识,对病变需认真观察,仔细分析,但更重要的是对临床资料及X线所见要特别重视。骨肿瘤形态变异较大,而临床X线观察较全面,病理镜检有一定局限性,而一些癌基因改变是与某一型[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 运用

摘要:癌症为基因突变造成的疾病,是由于细胞生长、分化及分裂繁殖等有关的基因产生病变所造成的。这些基因包括促进细胞分裂及繁殖的致癌基因,抑制细胞分类及繁殖或促进细胞分化的抑癌基因。当致癌基因过度活化或抑癌基因不活[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 运用 骨肿瘤 研究

摘要:1、在骨肿瘤发病机理研究中的应用骨恶性肿瘤是多种癌基因多阶段多途径协同作用的结果,到目前为止,发现与骨恶性肿瘤密切相关的癌基因有K-ras、c-fos、proα-1、proα-2、c-sis、c-raf、 c-myc、met、mdm2,抗癌基因有[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:26
标签: PCR 运用

摘要:PCR除了是一个诊断工具外,更重要的是它有广泛的运用。PCR本身可直接用来鉴定特定基因的存在与否,也可以用来侦测基因是否有异常 (Gene mutation, deletion, and rearrangement…)。例如,在医学上对遗传疾病或肿瘤[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 22:25
标签: PCR基因芯片 荧光PCR反应 Taqman探针 荧光染料

摘要:基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组[阅读全文]

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