角膜、结膜上皮损伤或有溃疡时，可被荧光素染色，方法是点无菌的1%荧光素液于结膜囊内，然后用生理盐水冲洗，亦可用玻璃棒蘸少量药液于结膜囊内，进行观察。此时可见角膜、结膜破损处有嫩绿色着色，上皮完整处不染色。如有角膜瘘，点荧光素后作轻压眼球，可见角膜表面布满黄绿色荧光素，而在瘘管处则有液体流出，状如清泉外流。操作时注意勿污染被检者面部及衣服。由于荧光素易被细菌污染，近来主张改用消毒荧光素滤纸，使用时将其一端用生理盐水浸湿后，与结膜相接触，泪液呈黄绿色，角膜损伤处染色。