MDCK细胞属长耳短尾猎犬肾细胞株，它使用的培养基是最常见的DMEM，加10%的小牛血清。37度，0.5%CO2。

细胞长到70%到80%培养瓶时既要传代。因为这个细胞贴壁特别牢，消化细胞时先弃去培养基，再用0.02%的EDTA洗一下培养瓶，这样做可以进一步去除血清对胰酶的影响，在弃去EDTA，在加0.02%的EDTA和0.25%的胰酶各一毫升，消化细胞，镜下观察细胞变圆即可弃去培养基，用含10%血清的培养基终止消化即可。注意用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶和0.02%的EDTA。

使用前37度预热，我以前只用0.25%的胰酶消化细胞，这个细胞要消化半小时以上都不能被消化下来，而且细胞如果长的过满，加0.02%的EDTA也很难消化下来。将已消化下来的细胞吹打均匀，然后吸入离心管中1000转离心1分钟，然后弃掉上清，将离心管中的细胞吹打均匀，加新培养基，分至2-3个新的培养瓶中，补足培养液。将培养瓶平放，小心移入37度二氧化碳培养箱中培养过夜。次日观察。