我也在养A549细胞，也来讲讲自己的经验，希望大家共同学习。

我们主要是看细胞的密度，大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了，时间长短不一，大概有5-7天吧，一瓶一般传3-4瓶，中间一般会有一次换液的。

培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基，然后用PBS洗一两次，然后再用0.25%胰酶消化（100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右），可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆，缝隙变大（我的细胞大概要2min左右），即可倒去消化液，加入培养基，吹打细胞（我们这大概吹打150次左右，注意四周边缘的细胞较密，要多吹打几次，最好慢慢吹不要产生泡泡），然后分装，如果分装时细胞液不够，可再分别加入培养基。