换液过程

50ml 培养瓶弃培养液，加入培养液3ml冲洗一次。

加入10ml培养液

传代

弃培养液 D-hank's 冲洗1次 0.5%胰蛋白酶和0.1%EDTA 2：1 比例1ml洗一次 6ml消化。

第一次传代是很难消化，需要在倒置显微镜下观察，有60%细胞脱壁时 吸出全部消化液立即加入含10%血清的培养液种植消化。

含有细胞的消化液离心800g 10min分离细胞，然后用10ml培养液打散细胞并接种到50ml培养瓶中。

在以后的传代过程中可不必消化道60% 细胞脱壁，当达到有5%细胞脱壁时，即可终止消化，然后用20ml培养液冲洗细胞层将细胞打散。取10ml接种到另一培养瓶中。