(一)plasmid上有NEO标记 1)如果是贴壁的细胞系,最好还是用lipo2000转染,在用真核筛选标记筛选。 2)如果是悬浮的细胞系,可用电转或者lipo2000,在用真核筛选标记筛选。 3)原代细胞,尽量选用对细胞伤害较小的,如lipo2000,DEAE等,plasmid上如有EGFP,上FACS分选。没有,那就只能用真核筛选标记筛选。但可以考虑用用分子生物学方法连EGFP,不难。但需要有带分选功能的FACS。 (二)plasmid上没有NEO标记 对于不同的细胞,方法同上,但均需要用共转染的方法,可参考我对一位朋友的回帖: http://www.biox.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9662575&sty=1 细胞内导技术.doc (119.0k) |
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