养细胞就像养孩子，甚至比养孩子还难。忘记是谁这么说了。上次一次性死了14瓶细胞，前后分析都是培养基污染了。然后换了新培养基，换了新的种子，开始长得不错，但今天看了一下，又污染了，培养基变浑浊。我养的是HUVEC，8月4日从一个老师处取种子（8月3日复苏），他原先是用高糖DMEM培养的，而我用的是1640。在倒置显微镜下，细胞形态不是太好，而且有小黑点。我用1640换掉原先的DMEM培养基，5，6日两天还可以，只是细胞长得慢。但今天就污染了。养细胞真是不知道什么时候就污染掉了。决定把血清和培养基检测一下，看看是不是在这个环节上出问题了。可能还有别的问题，战友们多多指教。

应该是细菌污染，如果是霉菌的话,一般不会这么快，你前后用的是不是同一种培养液？如果是的话,立即停用。首先要排除培养液的问题，因为同时有14瓶细胞污染，培养液的问题比较大。因此配制培养液后一定要做无菌试验，过滤时要注意滤膜本身及其安装是否有问题；其次，要排除培养液保存问题，比如，瓶盖有裂隙或者是盖子与瓶口不合，密闭性差，容易细菌污染。还有就是操作过程中出了问题，不注意无菌操作，消毒不严格，造成培养液的污染。超净工作台、手的消毒，拿培养瓶时不要拿盖子及其周围，培养液开盖后要斜着放，瓶盖横放，盖口不要向上或向下，培养瓶等尽量放在工作台的中间等等。总之，关键是无菌及无菌操作，做到这两点应该不会出什么差错了。