猪猪乐问：请教各位大虾，我做脂肪细胞的培养，想测定细胞内胆固醇和脂肪酸的含量，有什么方法吗？

mjf0202回复：液相，先处理一下，以免伤柱子~~

shuangzizuo回复：胆固醇用硫磷铁显色就可以做了，不过细胞要比较多。我刚做的标曲，能测到10-100ug/ml.我做的是巨噬，脂肪含量应该比你的低多了。

moodlytree问：我也要测泡沫细胞内的胆固醇含量，酶法荧光定量的原理是什么呢？可以跟我说说吗？

shuangzizuo回复：酶荧光法的原理就是 用胆固醇酯酶把胆固醇酯水解成胆固醇，然后用胆固醇氧化酶将其氧化得到cholest-4-en-3-one，它再在辣根过氧化物酶的催化下与H₂O₂反应生成荧光产物。其间需要三种酶胆固醇酯酶，胆固醇氧化酶，辣根过氧化物酶，ms不便宜。市售的血清胆固醇测定试剂盒是混合的酶，没法分开。硫磷铁的具体方法手边没有，你可以看生化实验书，写得非常清楚。