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21 过氧化物酶试验
试剂:2%儿茶酚溶液。
3%过氧化氢溶液。
试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1mL。静置于室温(20℃)中30~60min,观察结果。
结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色。
注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制。

22 磷酸盐缓冲液
储存液
磷酸二氢钾 34g
1mol/L氢氧化钠溶液 175mL
蒸馏水 825mL
pH7.2
制法:先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000mL。
稀释液:取储存液1。25mL,用蒸馏水稀释至1000mL,分装每瓶100mL或每管10mL,121℃高压灭菌15min。

23明胶磷酸盐缓冲液
成分:
明胶 2g
磷酸氢二钠 4g
蒸馏水 1000mL
pH6。2
制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min。

24 乳酸-苯酚溶液
成分:
苯酚 10g
乳酸(比重1.21) 10g
甘油 20g
蒸馏水 10mL
制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油。
用途:检验真菌形态时用。

25 肉浸液肉汤
成分:
绞碎牛肉 500g
氯化钠 5g
蛋白胨 10g
磷酸氢二钾 2g
蒸馏水 1000mL
制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4~7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30min。

26肉浸液琼脂
成分:
肉浸液肉汤(PH7.4) 1000mL
琼脂 17~20g
制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min。根据需要,倾注平板或放成斜面。

27牛肉(或牛心)消化汤
成分:
绞碎牛肉(或牛心) 1000g
15%氢氧化钠溶液 27mL
胰蛋白酶 40mL
三氯甲烷 1mL
氯化钠 10g
蒸馏水 2000mL
制法:
1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min。
2 加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃。
3 加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4~5h,每小时摇动一二次。
4 4h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之。若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出。
5 加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性。
6 煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜。
7 次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸。
8 校正pH7.4~7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min。
注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨。
②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用。

28血消化汤
成分:
绞碎猪胃 100g
绞碎猪血块 100g
蒸馏水 1000mL
浓盐酸 10mL
制法:
1 洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎。
2 用绞肉机将猪血块绞碎。
3 将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动。
4 从水浴内取出,加入1moL/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜。
5 吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2~7.4。
6 用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min。

29豆粉琼脂
成分:
牛心消化汤(PH7.4~7.6) 1000mL
琼脂 20g
黄豆粉浸液 50mL
制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤。加入豌豆粉浸液,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min。
豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100mL。置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜。吸取上清液即为豌豆浸液。

30血琼脂
成分:
pH7.4~7.6豆粉琼脂 100mL
脱纤维羊血(或兔血) 5~10mL
制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板。亦可分装灭菌试管,置成斜面。亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。

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