26肉浸液琼脂 成分: 肉浸液肉汤(PH7.4) 1000mL 琼脂 17~20g 制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min。根据需要,倾注平板或放成斜面。
27牛肉(或牛心)消化汤 成分: 绞碎牛肉(或牛心) 1000g 15%氢氧化钠溶液 27mL 胰蛋白酶 40mL 三氯甲烷 1mL 氯化钠 10g 蒸馏水 2000mL 制法: 1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min。 2 加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃。 3 加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4~5h,每小时摇动一二次。 4 4h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之。若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出。 5 加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性。 6 煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜。 7 次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸。 8 校正pH7.4~7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min。 注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨。 ②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用。
28血消化汤 成分: 绞碎猪胃 100g 绞碎猪血块 100g 蒸馏水 1000mL 浓盐酸 10mL 制法: 1 洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎。 2 用绞肉机将猪血块绞碎。 3 将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动。 4 从水浴内取出,加入1moL/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜。 5 吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2~7.4。 6 用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min。
29豆粉琼脂 成分: 牛心消化汤(PH7.4~7.6) 1000mL 琼脂 20g 黄豆粉浸液 50mL 制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤。加入豌豆粉浸液,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min。 豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100mL。置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜。吸取上清液即为豌豆浸液。
30血琼脂 成分: pH7.4~7.6豆粉琼脂 100mL 脱纤维羊血(或兔血) 5~10mL 制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板。亦可分装灭菌试管,置成斜面。亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。
|