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3t3细胞150X的照片

         

照这张照片的时候,细胞中存在许多微小的颗粒(就是很多人都讨论过的培养液中存在的小黑点问题),在荧光染色下为红色,如图中箭头所示,同样胞质也是红色。

        

生命经纬网友midas的观点为:

我感觉那些看似像是在胞浆,以及在细胞周围的红色着色,不应该是扩散到细胞质中的DNA或RNA,因为胞浆内有许多DNA或RNA裂解酶,它们可以在瞬间把DNA或RNA裂解成极小的片断,这样就不能为染料着色。

所以我认为这些红色的着色,最有可能是细胞周围的一些脏东西,它们可以吸附染料。

这张,同样的药物处理,同样的结果

      

这张也很有趣,药物处理后,细胞核明显变小了

     

这个作用后细胞数很少

     

另一种药物作用后的结果

     

这张本来是3t3细胞

      

加药后明显有些不同,不知道为什么核很亮很圆,而细胞质不着色。

生命经纬网友jeantan的问题为:

如何染的?这么漂亮。可以共享一些方法吗?

生命经纬网友icepiao的回答为:

我是先配染液,是AO(100mg/ml),EB(100mg/ml)1:1混合液

染色前作细胞爬片,我是在六孔板中作的,一个孔正好放一片玻片,弃营养液,PBS洗两遍,加入2mlPBS同时加入80ul的染液,避光染色20ml,然后再用PBS洗两遍以去掉多余的染料,取出玻片倒扣在载波片上置荧光显微镜下观察。

这样的细胞算不算凋亡?

     

生命经纬网友hongluoque的问题为:

我们这以前没人作过这方面的东西,有荧光显微镜,但是没人会用,我照着说明书做,但是怎么也找不到紫外光,就是看不见细胞核的荧光。麻烦告诉一声,谢谢了。

生命经纬网友icepiao的回答为:

首先要打开紫外光源,不是普通光源,一般是高压汞灯光源;其次要选择好模块,不同的染料需要不同的激发波长和阻断波长,使用紫外光源时要将可见光源暂时关闭。

药物处理后的HL-60细胞,显示坏死.

      

生命经纬网友httpasas的问题为:

icepiao的照片很漂亮,背景也很干净,经过处理了吗?

我的怎么背景特别脏,片子我都仔细擦过了,不知道是什么原因啊

生命经纬网友icepiao的回答为:

照片是没有处理的,背景脏有可能是染料浓度过高

或者波片没有处理干净,搽好像不行吧,我是先用洗涤剂洗,然后用浸泡在无水乙醇中待用,用前取出自然凉干,有水迹是不用的,而且不同不同质量的波片影响也蛮大的

生命经纬网友olddream520的问题为:

请问要做药物处理后的悬浮细胞是否凋亡,可以用荧光染料H33258,可不可以用H33342,两者做起来方法上有区别吗?试剂贵吗?只要做一点点,有小包装的吗?

生命经纬网友icepiao的回答为:

可能也有的,凡是染核DNA的染料,应该都可以的,我没有做过,这个你可能需要查阅一下相关的文献了。另,国内有许多代理国外小包装的公司。

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