大多数朋友说推荐培养液为DMEM加10%胎牛血清,1%谷氨酰胺,我们这里用1640加10%新生牛血清,效果也不错。DMEM不容易观察,有时候等DMEM黄了的时候,细胞已经严重缺乏养料,1640颜色变化比较明显,也比较符合细胞当时的情况。 细胞置于5%CO2、37度培养,细胞生长较快,根据你留在瓶里细胞的数量,50%两天后传代一次。0.25%胰酶+0.01%EDTA消化,该细胞容易抱团,我是一般先用胰酶洗一下,然后加胰酶37度,观察细胞形态变化,细胞变圆时,倒掉胰酶,加入培养液,吹打重悬。如果要铺板子进行相关实验,一般离心,500r/10min。 细胞消化一般是变圆以后我们终止消化,不是等细胞间隙一缩小就加培养液,细胞消化的充分一些,吹打得时候对细胞损伤小一些。 |
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