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标签: 腺病毒 病毒感染 293细胞

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问:最近做重组腺病毒的大量扩增,发现病毒感染293后24 h内细胞即90%变圆,40 h左右半数细胞飘起,不得不在48 h以内就收获细胞。此后降低病毒滴度(减少病毒用量)该现象未见明显改善。根据说明书,我用的感染方法是先用最小体积(如,10 cm皿用1~2 ml)病毒感染,90 min后再补液。据说也有先用稍大体积感染(如10 cm皿用3~4 ml),4~6 h后换液的感染方法,我没有见到有此类方法的报道,没有尝试。请问同仁中做腺病毒感染293细胞都是用哪种方法,如何调整MOI做到2~4 d收获感染的细胞?

答:不知你用的腺病毒(1-2 ml)滴度有多高,是不是病毒用量太大了,我做腺病毒扩增的时候,大概用50-100 μl/瓶(75 cm2),加入病毒前换培养液,之后不用换液,直到3 d左右收集病毒,效果比较好。

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